[发明专利]一种生物体液中草甘膦、草铵膦及代谢物的检测方法

说明书

本发明提供了一种生物体液中草甘膦、草铵膦及代谢物的检测方法，包括以下步骤：通过蛋白沉淀处理和固相萃取净化对标准基质工作溶液和待测生物体液进行处理，随后进行液相色谱‑质谱分析，并将待测生物体液与标准基质工作溶液的分析结果进行比对，确认待测生物体液中是否含有草甘膦、草铵膦及代谢物。本发明提供的检测方法，可有效对生物体液中草甘膦、草铵膦及代谢物共8种化合物进行同时检测，检测过程中8种化合物的保留时间稳定，检测重现性高，同时也省去了检测前衍生化或柱后衍生化的步骤，提高了检测灵敏度，节约了生物体液的使用量，适用于在检材量有限，尤其是涉及到死亡的案例检测。

技术领域

本发明涉及一种生物体液中草甘膦、草铵膦及代谢物的检测方法，涉及分析化学技术领域。

背景技术

草甘膦和草铵膦是一类非选择性、内吸型除草剂，在我国农药生产中应用广泛，据统计，这两种农药的生产量和使用量均位于世界前列。草甘膦和草铵膦的毒性不大，但也有研究表明其具有一定的致癌风险，加之投毒、误服、自杀等原因的中毒(案)事件时有发生，导致生物体液内草甘膦、草铵膦及代谢物的检测需求逐渐增大。

由于液相色谱-质谱联用技术具备灵敏度高，分析范围广，分析时间短等优点而被广泛应用于化合物的检测中，但是基于生物体液的复杂性和草甘膦、草铵膦及代谢物(以下简称待测化合物)的化学性质，常规检测方法的效果并不理想，例如，生物体液中的基质会对待测化合物存在干扰，导致待测化合物的保留时间无法与标准品对应，重现性较差；草甘膦、草铵膦及代谢物均为强极性化合物，易溶水，无法通过常规色谱条件进行分离，目前可以通过衍生化的方法，降低草甘膦和草铵膦及代谢物的极性，延长保留时间，但是衍生化方法比较复杂，容易造成待测样品的浪费，检测灵敏度降低，因此，如何合理利用液相色谱-质谱联用技术检测生物体液中是否含有草甘膦、草铵膦及代谢物受到了越来越多的关注。

发明内容

本发明提供了一种利用液相色谱-质谱联用技术检测生物体液中是否含有草甘膦、草铵膦及代谢物的方法，该方法可避免生物体液中基质的影响，重现性好，并且该方法无需衍生化过程，灵敏度高，用量少，可满足司法鉴定的需求。

本发明提供了一种生物体液中草甘膦、草铵膦及代谢物的检测方法，包括以下步骤：

在空白生物体液内加入草甘膦、草铵膦及代谢物的标准品，配制成标准基质工作溶液，对所述标准基质工作溶液依次进行蛋白沉淀处理和固相萃取处理后进行液相色谱-质谱分析，得到标准基质工作溶液的分析结果；

采用与标准基质工作溶液相同的方法对待测生物体液进行处理和液相色谱-质谱分析，得到待测生物体液的分析结果；

将待测生物体液与标准基质工作溶液的分析结果进行比对，确认生物体液中是否含有草甘膦、草铵膦及代谢物；

其中，液相色谱条件包括：色谱柱为阴离子色谱柱，流动相A为纯水，流动相B为碳酸氢铵溶液和氨水，梯度洗脱。