[发明专利]一种引物组、试剂盒及其在快速鉴定花椒根腐病菌中的应用在审
| 申请号： | 202110206459.7 | 申请日： | 2021-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN113999926A | 公开（公告）日： | 2022-02-01 |
| 发明（设计）人： | 杨潇湘;刘勇;张蕾;黄小琴;张重梅;唐蓉;鲜赟曦;周西全 | 申请（专利权）人： | 四川省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/77 |
| 代理公司： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 | 代理人： | 胡琳梅 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 引物 试剂盒 及其 快速 鉴定 花椒 病菌 中的 应用 | ||
1.一种引物组，其特征在于，包括上游引物F1和下游引物R1，序列如下：
上游引物F1：5'-CGTGTCGCAGAAGAGGG-3'；
下游引物R1：5'-AATAGGAAGCCGCTGAGC-3'。
2.包含权利要求1所述的引物组的试剂盒。
3.权利要求1所述的引物组或权利要求2所述的试剂盒在快速鉴定花椒根腐病菌中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述花椒根腐病菌为腐皮镰刀菌。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述快速鉴定腐皮镰刀菌的方法，包括以下步骤：
S1.提取样本DNA；
S2.以所述样本DNA为模板，利用所述引物组进行PCR扩增反应，得到PCR扩增产物；
S3.分析所述PCR扩增产物。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，以25μL计，所述PCR扩增反应的反应体系为：
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述上游引物F1和下游引物R1的浓度均为10μmol/L。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述样本DNA的浓度为50ng/μL。
9.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增反应的反应条件为：98℃预变性2min，98℃变性15s，58℃退火15s，72℃延伸30min，35个循环；72℃终止5min。
10.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述分析PCR扩增产物，是对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，若出现大小为210bp的目的条带，则存在腐皮镰刀菌；若未出现大小为210bp的目的条带，则不存在腐皮镰刀菌。
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