[发明专利]一种甲钴胺样品中杂质的分析方法

说明书

本申请公开了一种甲钴胺样品中杂质的分析方法。所述分析方法包括以下步骤：将含有甲钴胺样品的溶液I进行HPLC分离、检测，获得色谱图，根据所述色谱图得到所述杂质的含量；所述溶液I的溶剂为磷酸盐溶液I；所述HPLC分离的流动相包括流动相A和流动相B；所述流动相A包括磷酸盐溶液II；所述流动相B包括醇类；所述杂质包括氰钴胺和/或羟钴胺。所述分析方法的分析体系中不含有乙腈，避免了在检测过程中杂质羟钴胺发生反应，可准确得到羟钴胺和/或氰钴胺的含量，该方法灵敏度高、准确性佳。

技术领域

本申请涉及一种甲钴胺样品中杂质的分析方法，属于药物分析技术领域。

背景技术

甲钴胺制剂的主要功能是修复损伤的神经，缓解麻木、疼痛和感觉异常，对周围神经病变具有良好的治疗作用，已在临床上得到广泛应用。甲钴胺原料是甲钴胺片的有效成分，而甲钴胺原料主要是由氰钴胺(结构式1)甲基化反应得来，因此，甲钴胺原料中含有残存的氰钴胺，且由于甲钴胺化学性质不稳定，在强光下会降解生成羟钴胺(结构式2)，因此羟钴胺与氰钴胺作为甲钴胺原料的主要杂质，其含量的多少直接影响了甲钴胺原料及甲钴胺制剂的质量，准确测定甲钴胺原料及甲钴胺制剂中氰钴胺及羟钴胺的含量，是正确评价甲钴胺原料及甲钴胺制剂质量的重要指标，现有的中国药典、美国药典与日本药典中甲钴胺原料及甲钴胺制剂的检测方法均使用含有乙腈的溶液作为样品的溶解溶剂及HPLC分离的流动相，甲钴胺原料及甲钴胺制剂的杂质羟钴胺在含有乙腈的溶液中与乙腈逐渐反应生成另一种杂质氰钴胺，不能准确测定甲钴胺原料及甲钴胺制剂中氰钴胺及羟钴胺的含量。

发明内容

根据本申请的一个方面，提供一种甲钴胺样品中杂质的分析方法，所述分析方法分析体系中不含有乙腈，可避免在检测过程中杂质羟钴胺发生反应而影响检测结果。

一种甲钴胺样品中杂质的分析方法，所述分析方法包括以下步骤：将含有甲钴胺样品的溶液I进行HPLC分离、检测，获得色谱图，根据所述色谱图得到所述杂质的含量；

所述溶液I的溶剂为磷酸盐溶液I；

所述HPLC分离的流动相包括流动相A和流动相B；

所述流动相A包括磷酸盐溶液II；

所述流动相B包括醇类；

所述杂质包括氰钴胺和/或羟钴胺。

可选地，所述分析方法包括以下步骤：将含有甲钴胺样品的溶液I进行HPLC分离、检测，获得色谱图，根据所述色谱图得到所述杂质的含量；

所述溶液I的溶剂为磷酸盐溶液I；

所述HPLC分离的流动相包括流动相A和流动相B；

所述流动相A为磷酸盐溶液II；

所述流动相B为醇类；

所述杂质包括氰钴胺和/或羟钴胺。

可选地，所述甲钴胺样品包括甲钴胺原料和/或甲钴胺制剂。

可选地，所述甲钴胺制剂包括甲钴胺片、甲钴胺注射液中的至少一种。

可选地，所述溶液I中甲钴胺的浓度为1～150μg/ml。

可选地，所述溶液I中甲钴胺的浓度上限选自1、5、10、20、50、100、或150μg/ml；下限选自1、5、10、20、50、或100μg/ml。

可选地，所述磷酸盐溶液I中的磷酸盐包括磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢胺中的至少一种。

可选地，所述磷酸盐溶液I的浓度为0.01～0.05mol/L。

可选地，所述磷酸盐溶液I的浓度为0.02～0.04mol/L。