[发明专利]一种甲钴胺样品中杂质的分析方法

权利要求书

1.一种甲钴胺样品中杂质的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括以下步骤：将含有甲钴胺样品的溶液I进行HPLC分离、检测，获得色谱图，根据所述色谱图得到所述杂质的含量；

所述溶液I的溶剂为磷酸盐溶液I；

所述HPLC分离的流动相包括流动相A和流动相B；

所述流动相A包括磷酸盐溶液II；

所述流动相B包括醇类；

所述杂质包括氰钴胺和/或羟钴胺。

2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括以下步骤：将含有甲钴胺样品的溶液I进行HPLC分离、检测，获得色谱图，根据所述色谱图得到所述杂质的含量；

所述溶液I的溶剂为磷酸盐溶液I；

所述HPLC分离的流动相包括流动相A和流动相B；

所述流动相A为磷酸盐溶液II；

所述流动相B为醇类；

所述杂质包括氰钴胺和/或羟钴胺。

3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述甲钴胺样品包括甲钴胺原料和/或甲钴胺制剂。

4.根据权利要求3所述的分析方法，其特征在于，所述甲钴胺制剂包括甲钴胺片、甲钴胺注射液中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述溶液I中甲钴胺的浓度为1～150μg/ml。

6.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述磷酸盐溶液I中的磷酸盐包括磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢胺中的至少一种。

7.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述磷酸盐溶液I的浓度为0.01～0.05mol/L。

8.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述磷酸盐溶液II中的磷酸盐包括磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢胺。

9.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述磷酸盐溶液II的浓度为0.01～0.05mol/L。

10.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述醇类包括甲醇；

优选地，所述流动相A和所述流动相B的体积比为75～90：10～25；

优选地，所述HPLC分离所用的色谱柱的填充剂包括C2～C18烷基硅烷键合硅胶、氰基硅烷键合硅胶或氨基键合硅胶中的至少一种；

优选地，所述HPLC分离的柱温为10～60℃；

优选地，所述HPLC分离的洗脱程序为：

第0～10分钟中，流动相中流动相A的体积占比由90％变化至86％，和流动相B的体积占比由10％变化至14％；

第10～35分钟中，流动相中流动相A的体积占比由86％变化至85％，流动相B的体积占比由14％变化至15％；

第35～45分钟中，流动相中流动相A的体积占比由85％变化至75％，流动相B的体积占比由15％变化至25％；

第45～55分钟中，流动相中流动相A的体积占比为75％，流动相B的体积占比为25％；

第55～55.01分钟中，流动相中流动相A的体积占比由75％变化至90％，流动相B的体积占比由25％变化至10％；

第55.01～65分钟中，流动相中流动相A的体积占比为90％，流动相B的体积占比为10％；

优选地，所述检测的波长为332～352nm；

优选地，所述分析方法的羟钴胺的检测限为0.89ng，定量限为2.98ng，氰钴胺的检测限为0.91ng，定量限为2.74ng。