[发明专利]4-氯丁酸的检测方法

说明书

本发明涉及一种4‑氯丁酸的检测方法，尤其涉及原料药中4‑氯丁酸物质的检测方法。采用气相色谱‑质谱联用法进行检测，包括将待测样品中的4‑氯丁酸衍生为4‑氯丁酸酯；其中，气相色谱检测的条件包括：色谱柱，选用5％苯基‑95％‑二甲基聚硅氧烷共聚物固定液色谱柱。本发明提供的4‑氯丁酸的检测方法简单稳定可靠，可用于原料药中4‑氯丁酸残留检测。

技术领域

本发明涉及4-氯丁酸的检测方法，尤其涉及原料药中4-氯丁酸的检测方法。

背景技术

4-氯丁酸是一种无色透明液体，在原料药合成过程中，它是最为常用的医药方面的中间体之一。近年来，原料药中基因毒杂质研究要求的提高，使得如4-氯丁酸等物质被确定为基因毒杂质，成为原料药检测中必需研究内容。基因毒性杂质来源于原料药合成过程中的起始物料、中间体、试剂和反应副产物，也可能是由药物在合成、储存或者制剂过程中降解产生的。其特点是在低浓度时即可造成人体遗传物质的损伤，进而导致基因突变并可能促使肿瘤发生，对人体用药安全性产生威胁。在现有的药品质量控制标准中，需进行严格控制。

目前，针对4-氯丁酸的检测无成熟可靠稳定的方法，无法实现原料药中的4-氯丁酸残留的限度控制和制定相应的质量检测标准。

发明内容

本发明提供一种4-氯丁酸的检测方法，该方法简单稳定可靠，可以用于原料药中4-氯丁酸残留检测。

一种4-氯丁酸的检测方法，采用气相色谱-质谱联用法进行检测，包括：

将待测样品中的4-氯丁酸衍生为4-氯丁酸酯；

其中，气相色谱检测的条件包括：

色谱柱，选用5％苯基-95％-二甲基聚硅氧烷共聚物固定液色谱柱。

根据本发明实施例，将待测样品中的4-氯丁酸衍生为4-氯丁酸甲酯或4-氯丁酸乙酯，具体可使用甲醇或乙醇进行衍生。发明人发现，使用甲醇进行衍生，能够兼顾衍生反应和样品的溶解性。

根据本发明实施例，将待测样品中的4-氯丁酸衍生为4-氯丁酸甲酯的反应历程如下：

以上衍生反应在硫酸的催化作用下进行。该衍生反应可在室温下即可进行，无需加热等特殊反应条件。

类似地，4-氯丁酸与乙醇反应可衍生为4-氯丁酸乙酯。

采用通常的气相检测方法，4-氯丁酸在进样口处不稳定，通常较难进行检测，无法实现直接检测。本发明人研究发现，将待测样品中的4-氯丁酸衍生为4-氯丁酸酯后，衍生后产物化学性质相对稳定，且在色谱柱中有良好的保留性质，可以采用气相色谱-质谱联用仪器进行定量检测。

根据本发明实施例，以上衍生反应在顶空瓶内衍生，衍生后直接进样检测。

根据本发明实施例，以上衍生反应(例如在顶空瓶内衍生)的温度为80-90℃，反应时间为30-40min，这样可以保证4-氯丁酸与衍生剂完全反应并且生成稳定的衍生产物，检测时信号响应良好，峰型良好具有较高的检测灵敏度。本发明所述的衍生剂是指能够与4-氯丁酸反应生成4-氯丁酸酯的醇，例如甲醇或乙醇。

根据本发明实施例，载气为氮气，流速范围为0.9～1.1ml/min，具体流速值需进行方法开发时，结合对照品的出峰时间，进行调整，使对照品出峰时间在10min内。在该时间段内，为升温程序初始升温阶段，仪器基线平稳，利于检测方法中灵敏度的提高，同时也有利于对照品在低浓度检出，具有较低的检测限和定量限。

根据本发明实施例，进样体积，采用顶空进样模式，进样体积固定为1ml，结合对照品仪器信号响应，可适当调整分流比，保证色谱峰的峰型、灵敏度和信号响应强度。