[发明专利]一种II型糖尿病斑马鱼模型的构建方法及应用有效

专利信息
申请号: 202110197959.9 申请日: 2021-02-22
公开(公告)号: CN112997928B 公开(公告)日: 2023-01-17
发明(设计)人: 彭仁义;金立波;李瑶琦;孙达;林苏娥;嵇豪;王磊;陈豪杰 申请(专利权)人: 温州大学
主分类号: A01K61/10 分类号: A01K61/10
代理公司: 深圳国联专利代理事务所(特殊普通合伙) 44465 代理人: 钟志芸
地址: 325005 浙江省温州市*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 ii 糖尿病 斑马 模型 构建 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种II型糖尿病斑马鱼模型的构建方法,其特征在于,其构建步骤如下:

S1:挑选3月龄期的斑马鱼若干条,分为两组,分别为对照组和实验组,所述对照组和实验组的数量一致;

S2:对照组斑马鱼喂养的饲料为活体丰年虫,系统循环水培育;实验组斑马鱼喂养的饲料为高糖高脂饲料,葡萄糖水和系统循环水进行交替培育,交替时间为24小时;

葡萄糖水的浓度为1%;

S3:15天后,分别在进食后的0.5小时和12小时后对实验组和对照组的马鱼取血进行血糖检测;实验组的斑马鱼0.5小时和12小时后的血糖数据均为对照组的2倍以上,则II型糖尿病斑马鱼模型构建成功。

2.根据权利要求1所述的一种II型糖尿病斑马鱼模型的构建方法,其特征在于,步骤S2中的高糖高脂饲料的制备方法为:将煮熟后用烘箱55℃烘6小时后的鸡蛋黄和用研磨机磨成细粉的胆固醇以重量比为9:1混合,拌匀,然后用真空冻干机冻干10小时,取出即可。

3.根据权利要求1所述的一种II型糖尿病斑马鱼模型的构建方法,其特征在于,步骤S3中斑马鱼取血进行血糖检测的步骤为:

S1:将斑马鱼放入冰水混合物中2~3秒,用镊子夹出放在吸水纸上吸干水分;

S2:将玻璃培养皿放在碎冰上预冷一分钟,提前配置0.5M/L的EDTA-Na溶液,并用移液枪吸取10 uL EDTA-Na滴在培养皿上,并用镊子将表面无水分的斑马鱼腹部压在溶液上;

S3:用手术刀切割斑马鱼,分离头部与脖颈,用镊子轻轻按压斑马鱼切口处,使血液渗出;

S4:将血糖仪试纸对准伤口处收集血液,即可快速读出血糖值。

4.一种如权利要求1至3任一项所述的构建方法得到的II型糖尿病斑马鱼模型的应用,其特征在于,所述II型糖尿病斑马鱼模型在糖尿病病理机制研究的应用或在筛选与评价治疗Ⅱ型糖尿病药物中的应用。

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