[发明专利]一种从蓝莓花青素提取物中制备5种花色苷标准品的方法

权利要求书

1.一种从蓝莓花青素提取物中制备5种花色苷标准品的方法，其特征在于，将含有5种花色苷成分的蓝莓花青素待制溶液经有机滤膜处理后，进入半制备高效液相色谱处理，制得5种花色苷标准品；色谱柱条件为：制备柱：C18；流速：4mL/min；检测波长：520nm；检测温度：25℃；检测时间：80min；流动相：水相B为0.1%三氟乙酸水溶液，有机相A为乙腈；梯度洗脱；

所述梯度洗脱的条件为：0~19min 91%B 9%A；20~29min 90%B 10%A；30~39min 89%B11%A；40~49min 87%B 13%A；50~59min 86%B 14%A；60~69min 85%B 15%A；70~77min 80%B20%A；78min 91%B 9%A；

所述5种花色苷是指飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛花素-3-O-葡萄糖苷、芍药色素-3-O-葡萄糖苷、锦葵色素-3-O-葡萄糖苷；

所述蓝莓花青素提取物是按照以下技术制成：蓝莓鲜果中投入0.3%量的复合酶，复合酶由纤维素酶和果胶酶按2:1的质量比组成，37℃下避光酶解4小时；然后再加入含1%柠檬酸的75%乙醇提取6小时，过滤得到滤液和滤渣；滤渣再加入含1%柠檬酸的75%乙醇提取6小时，重复2次；合并三次的滤液，减压浓缩至一半的体积，加入2倍体积的乙酸乙酯萃取3次；合并下层，减压浓缩后，通过D101大孔吸附树脂进行花青素的富集，经30~50%的乙醇洗脱，冷冻干燥处理，获得蓝莓花青素提取物。

2.如权利要求1所述的从蓝莓花青素提取物中制备5种花色苷标准品的方法，其特征在于，所述C18柱为Venusil MP C18，规格为 5µm 100Å 10×250mm。

3.如权利要求1所述的从蓝莓花青素提取物中制备5种花色苷标准品的方法，其特征在于，所述蓝莓花青素待制溶液是将蓝莓花青素提取物溶于甲醇水溶液制成，甲醇水溶液中甲醇的含量为0~50w%。

4.如权利要求3所述的从蓝莓花青素提取物中制备5种花色苷标准品的方法，其特征在于，所述蓝莓花青素待制溶液中蓝莓花青素提取物的浓度为1mg/ml-50mg/ml。

5.如权利要求1所述的从蓝莓花青素提取物中制备5种花色苷标准品的方法，其特征在于，所述蓝莓花青素待制溶液的上样量为1mg-10000mg。

6.如权利要求1所述的从蓝莓花青素提取物中制备5种花色苷标准品的方法，其特征在于，所述有机滤膜的孔径为0.22µm。