[发明专利]可治愈性传播感染病原体检测体系及其试剂盒和应用

说明书

本发明涉及一种可治愈性传播感染病原体检测体系及其试剂盒和应用，分别检测梅毒螺旋体、阴道毛滴虫、沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、解脲脲原体和人型支原体的6对引物和1对人DNA内参引物，1对系统质控内参引物。本发明的可治愈性传播感染病原体检测体系及其试剂盒不需要采用常规培养等步骤，可在同一反应体系内直接对生殖道分泌物样本进行6种难培养病原体的同步鉴定和半定量分析，具有特异性强、灵敏度高、重复性好、快速准确的优势，能在第一时间为临床和患者提供全面、精准、低成本的病原学诊断依据，为个体化用药和精准医疗提供重要参考。

技术领域

本发明涉及一种多重基因检测产品以及该产品所用到的检测体系，属于生物技术领域。

背景技术

性传播感染(sexually transmitted infections,STIs)是临床上较为常见的传染性疾病之一，是指通过性接触行为而传染的疾病，主要病变部位在生殖系统部位，不仅可引起生殖系统炎症，严重时还可引起不孕不育，甚至累及神经、心血管、骨骼等系统，造成局部或全身的病变。

引起STIs的可治愈性病原体主要包括梅毒螺旋体、淋病奈瑟菌、支原体、衣原体、阴道毛滴虫等。其中，沙眼衣原体(CT)、淋病奈瑟菌(NG)、阴道毛滴虫(TV)和梅毒螺旋体(TP)是四种最常见的可治愈性传播感染病原体，自1995年以来，世界卫生组织(WHO)每隔5年会对这四种病原体在全球和区域范围内的流行率进行定期评估。据统计，每年约有3.57亿人由于感染这四种病原体而引起性传播疾病。国内流行病学调查表明，沙眼衣原体和淋病奈瑟菌在女性中的感染率分别为2.6％和0.08％，在男性中的感染率分别为2.1％和0.02％。沙眼衣原体和淋病奈瑟菌可引起男性附睾炎，女性盆腔炎和子宫内膜炎，最终引起两性不育。解脲支原体和人型支原体也属于性传播病原体，主要存在于泌尿生殖道，与生殖道和泌尿道感染有关，在世界范围内高度流行，泌尿生殖道支原体感染患者及病毒携带者是主要的传染源。根据相关资料显示，生殖道支原体感染的发病率位居全国监测的8种性传播疾病的首位。这两种病原体同时也是引起非淋菌性尿道炎的主要病原体，还与宫颈炎、盆腔炎、不孕症、流产和宫外孕等疾病密切相关。有研究表明，不孕女性中感染解脲支原体和人型支原体的概率显著高于具有生育能力的女性。此外，由于支原体、衣原体和淋病奈瑟菌引起的常见性传播感染在临床表现上不具有特异性或不表现任何临床症状，梅毒感染后存在一定的潜伏期，其诊断较为困难，而延迟诊断会严重影响患者的生殖系统功能，同时增加患者和医院的医疗负担。性传播疾病病原体因未及时筛查和发现而造成的持续性感染同时也是导致性传播疾病传染和广泛流行的重要原因，而这几种病原体因为感染过程较为隐匿而被患者忽略，从而错过最佳治疗时期，因此目前急需一种能对高危群体进行性传播病原体全面筛查的方法。

培养法是目前诊断感染性疾病的金标准，但上述常见的可治愈性传播感染病原体由于生长缓慢、培养程序复杂、需要特殊营养物质和培养基等原因，无法通过培养法完成同步筛查。例如，沙眼衣原体是寄生在细胞内，需要有专门的设施对其进行培养，并且工作量大，不适于中小型医院开展；支原体是能在人工培养基中增殖的最小微生物，菌落直径在10μm～600μm之间，但需要专门的培养基，并借助显微镜观察，检测流程和鉴定过程较为繁琐，不适用于临床实验室常规筛查。

近年来基因检测技术的迅速发展和普及弥补了培养法的缺陷，能不依赖培养法而直接检测人组织或样本中的病原体。现阶段，实时荧光定量PCR技术已经在国内医院基本普及和广泛应用，但该方法检测通量低，目前主要用于对疑似感染性疾病患者的样本或组织内单个病原体进行检测，无法通过一次单孔PCR反应同步对5种以上病原体完成筛查。当前国内临床实验室还尚未存在能对这些病原体进行同步筛查的检测技术和方法。

综上所述，目前常见可治愈性传播感染难培养病原体的检测和诊断方法不能满足临床需求，急需一种可以同步定量检测上述几种常见性传播感染难培养致病菌的检测技术和方法，从而帮助患者和临床医师及时全面筛查高危病性传播原体，发现潜在的感染，及时采取治疗。

发明内容