[发明专利]一种表达GLP-1样因子的重组菌及应用在审
| 申请号： | 202110180373.1 | 申请日： | 2021-02-08 |
| 公开（公告）号： | CN112831516A | 公开（公告）日： | 2021-05-25 |
| 发明（设计）人： | 李明义;刘刚;马凤龙;崔晓辰;刘星华;刘毅;李易 | 申请（专利权）人： | 青岛海华莱康生物医药技术有限公司;青岛海华生物医药技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/16;C12N1/21;C12P21/02;A61K38/26;A61K9/00;A61P3/10;A23L33/135;C12R1/01 |
| 代理公司： | 山东三邦知识产权代理事务所(普通合伙) 37308 | 代理人： | 肖太升;牛继梅 |
| 地址： | 266000 山东省青*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 表达 glp 因子 重组 应用 | ||
1.一种表达GLP-1样因子的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体是在表达载体中插入有编码GLP-1样因子的核苷酸序列；
所述编码GLP-1样因子的核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。
2.根据权利要求1所述的表达GLP-1样因子的重组表达载体，其特征在于，所述表达载体为pNZ8149。
3.一种表达GLP-1样因子的重组菌，其特征在于，所述重组菌是由权利要求1或2所述的重组表达载体转化导入到乳酸菌中所得。
4.根据权利要求3所述表达GLP-1样因子的重组菌，其特征在于，所述乳酸菌为乳酸乳球菌NZ3900。
5.根据权利要求3或4所述表达GLP-1样因子的重组菌，其特征在于，所述重组菌为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)HL19003，保藏编号为CCTCC NO：M 2020968。
6.权利要求5所述表达GLP-1样因子的重组菌在制备预防和治疗Ⅱ型糖尿病药物或食品中的应用。
7.权利要求5所述表达GLP-1样因子的重组菌在制备具有促进胰岛素分泌和胰岛细胞增殖功效的药物或食品中的应用。
8.使用权利要求5所述重组菌表达GLP-1样因子的方法，其特征在于，步骤为：
(1)将保藏编号为CCTCC NO：M 2020968的重组菌株接种到M17培养基，30℃静置培养20h；
(2)取步骤(1)培养后的培养液按3％接种到GM17培养基，30℃恒温静置培养，待OD600nm至0.4，加入Nisin进行诱导表达。
9.根据权利要求8所述重组菌表达GLP-1样因子的方法，其特征在于，所述Nisin加入终浓度为30ng/mL；诱导表达2-6h。
10.一种具有促进胰岛素分泌和胰岛细胞增殖功效的生物制剂，其特征在于，是由权利要求9所述方法诱导后的菌液，经离心去除菌体后的上清液。
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