[发明专利]木聚糖酶突变体及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202110178825.2 | 申请日： | 2021-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN112708608B | 公开（公告）日： | 2021-08-10 |
| 发明（设计）人： | 游帅;张温馨;查子千;谢晨;葛研;胡洋浩;王俊 | 申请（专利权）人： | 江苏科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12P19/14;A23K20/189;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 王颖 |
| 地址： | 212008 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 聚糖 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.木聚糖酶突变体，其特征在于，以木聚糖酶HwXyl10A为母本对Gly363位点饱和突变后得到2种高比活耐热木聚糖酶突变体HwXyl10A_G363R和HwXyl10A_G363K，所述HwXyl10A_G363R的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示；所述HwXyl10A_G363K的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。
2.编码权利要求1所述的木聚糖酶突变体的核苷酸序列。
3.如权利要求2所述的核苷酸序列，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3或SEQID NO：5所示。
4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体包括权利要求3所述的核苷酸序列。
5.一种重组菌株，其特征在于，包括权利要求4所述的重组载体或者在所述重组菌株的基因组中整合有权利要求3所述的核苷酸序列。
6.一种如权利要求1所述的木聚糖酶突变体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：以含有木聚糖酶基因HwXyl10a的重组表达载体pic9r-HwXyl10a为模板，采用定点突变的方法对Gly363位点进行饱和突变，获得含有木聚糖酶突变体的重组表达载体；
步骤2：所得木聚糖酶突变体重组表达载体转化毕赤酵母菌，获得毕赤酵母重组菌株；
步骤3：发酵培养毕赤酵母重组菌株，诱导重组木聚糖酶表达；
步骤4：回收并纯化高比活耐热的木聚糖酶突变体。
7.如权利要求6所述的木聚糖酶突变体的制备方法，其特征在于，所述毕赤酵母为毕赤酵母GS115。
8.一种如权利要求1所述的木聚糖酶突变体利用生物质降解木聚糖产糖中的应用。
9.一种如权利要求1所述的木聚糖酶突变体在降解饲料添加中的木聚糖中的应用。
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