[发明专利]促进牙髓干细胞增殖和成骨分化的多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种促进牙髓干细胞增殖和成骨分化的多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体，其特征在于：所述柚皮苷纳米脂质体是经RGD肽和TAT肽共同修饰后制得的柚皮苷脂质体。

2.如权利要求1所述的多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体，其特征在于：所述柚皮苷纳米脂质体的平均粒径为159.8～161.8nm，Zeta电位为-21.2～-20.0mV，载药量为6.75～6.90％。

3.如权利要求2所述的多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体，其特征在于：所述柚皮苷纳米脂质体的平均粒径为160.8nm，Zeta电位为-20.6mV，载药量为6.82％。

4.如权利要求1-3任一项所述的多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体在制备骨科术后促骨形成药物中的用途。

5.如权利要求1-3任一项所述的多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体在制备关节炎症骨缺损促骨修复药物中的用途。

6.如权利要求1-3任一项所述的多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体在制备颌面外科术后促骨重建药物中的用途。

7.一种如权利要求1所述的多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体的制备方法，包括以下步骤：

(1)载柚皮苷纳米脂质体的制备：按照物质的量比为1.2∶1，分别称取柚皮苷0.05-0.5g和相应质量的磷脂酰胆碱置于三角烧瓶中，加入四氢呋喃100ml；50℃水浴中磁力搅拌3h至溶液澄清，于40℃减压旋干，收集残留物即得柚皮苷-磷脂酰胆碱结合物；将所得柚皮苷-磷脂酰胆碱结合物溶解在200ml石油醚中，过0.22μm滤膜除去游离的柚皮苷；滤液经减压旋蒸后收集残留物即得柚皮苷-磷脂酰胆碱纯化物，密封备用；

称取1.5mg柚皮苷-磷脂酰胆碱纯化物、5.5mg卵磷脂EPC、2mg胆固醇和1mg二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基溶解于2ml无水甲醇中，充分振荡使其完全溶解；再将所得溶液加入至茄形瓶中，经减压旋蒸形成脂质薄膜；然后向茄形瓶中加入5mlpH＝7的PBS溶液轻摇水化，再依次经过400、200、100、80nm滤膜挤出过滤，即获得载柚皮苷纳米脂质体溶液，置于4℃冰箱中保存备用；

(2)多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体的制备：利用磷酸氢二钠溶液调节上述载柚皮苷纳米脂质体溶液pH至6，以0.1mg/ml浓度加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐活化脂质体表面的羧基基团；再与RGD肽和TAT肽共同孵育4h，RGD肽和TAT肽的浓度均为5mg/ml，然后经过Sephadex-25凝胶柱除去未连接的RGD肽和TAT肽，所得脂质体溶液经超滤离心柱浓缩后，置于4℃冰箱中保存，即得到多肽共修饰柚皮苷纳米脂质体。