[发明专利]一种快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法

说明书

本发明涉及一种快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，本发明将金‑银双功能基底插入不锈钢中空管针的中空腔内，将带有基底的不锈钢中空管针扎入活体生物组织内，对活体生物组织内三苯甲烷类化学物进行萃取；取出带有基底的不锈钢中空管针，利用拉曼光谱仪对金‑银双功能基底进行激发照射，进行拉曼光谱检测，根据拉曼特征峰分析检测。本发明的检测方法可以快速高效地对生物组织内三苯甲烷类化学物进行富集，并进行在线检测，无需对活体组织进行前处理，也无需采集血液，实现了萃取、检测一体化无需复杂的样品前处理，适合现场快速取样检测。

技术领域：

本发明涉及一种快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，属于分析化学技术领域。

背景技术：

随着国民经济的快速发展，城乡居民生活水平不断提高，人们的饮食结构正发生深刻的变化。水产品以其低脂肪、低胆固醇、高蛋白、营养丰富、味道鲜美等优点，正成为广大消费者所青睐的食品之一。

与其它肉类产品相比，微生物更易于在水产品体内繁殖，在水产品的肠道、皮肤、肌肉中我们很容易发现各种致病菌、病毒和寄生虫，养殖户为了预防和防治水产动物患病或受微生物污染，在养殖过程中会使用杀虫剂、杀菌剂等，养殖过程中常用的杀菌剂为三苯甲烷类化学物，既是染料，也是杀菌剂，可致癌，是我国明令禁止在食品中添加的非食用物质。这些药物的违规使用或不合理使用又会引发药物残留等质量安全问题。因此，加快水产品安全快速检测技术研究，提高水产品质量，建立健全水产品质量监督体系，对提高我国水产品在全球市场的竞争力，具有重要的现实意义和深远的战略意义。

三苯甲烷类化学物主要有孔雀石绿、隐孔雀石绿、结晶紫；目前三苯甲烷类化学物残留检测主要是气相色谱法和高效液相色谱法，对于水产品中三苯甲烷类化学物的检测通常以提取富集或浓缩后，再经色谱分离后以电子捕获、氢火焰、紫外或其它检测器进行检测，这种检测器检测方法准确、精密度高、检测限低，但相对来说检测时间长、前处理复杂、仪器设备要求高、操作难度大，因而通常只能应用于各种实验室检测，不适用于现场快速检测。随着人们对食品安全意识的增强，那些无污染的绿色健康食品越来越受到人们的欢迎。因此需要开发快速检测三苯甲烷类化学物的检测方法。

表面增强拉曼光谱(SERS)是一种快速无损的检测方法，可以获得分子特征结构，对水不敏感，样品前处理简单，在环境监测、食品安全和医药卫生等方面受到了广泛关注。固相微萃取(SPME)是一种无需溶剂，操作简单的样品前处理技术，适合复杂体系中现场取样。将固相微萃取与表面增强拉曼光谱联用，可以实现萃取检测一体化，提高检测效率。SERS检测技术中，SERS活性基底的选择和制备成为获得高质量SERS信号的关键。

目前的分析方法可以实现对水产品肉组织提取液中待测物的检测。如：使用N-异丙基丙烯酰胺@金基底的表面增强拉曼光谱测定水产品肉组织中的孔雀石绿。基于金@银基底的表面增强拉曼光谱测定水产品肉组织中的嘌呤含量。而对于活体生物，通常通过采集血液后利用液相色谱方法进行。液相色谱的优点是准确高，但是液相色谱法测定时样品前处理较为复杂，耗时长。

由于生物体内环境较为复杂，需要快速高效地富集待测物，并且要对活体伤害较小，因此，目前的检测手段只适用于水体或非活体生物体内检测，对于实现活体生物内快速原位检测仍是目前面临的一个挑战。

发明内容：

针对现有技术的不足，本发明提供一种快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法。

本发明的方法可以实现活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方便快速取样和拉曼检测，非常适合活体快速现场分析。本发明的金-银双功能基底均匀性好、稳定性高、有较强的拉曼增强因子。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，包括步骤如下：

1)利用电化学方法制备金-银双功能基底；