[发明专利]一种快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法

权利要求书

1.一种快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，包括步骤如下：

1)利用电化学方法制备金-银双功能基底；

2)将金-银双功能基底插入不锈钢中空管针的中空腔内，将带有基底的不锈钢中空管针扎入活体生物组织内，对活体生物组织内三苯甲烷类化学物进行萃取；

3)取出带有基底的不锈钢中空管针，利用拉曼光谱仪对金-银双功能基底进行激发照射，进行拉曼光谱检测，根据拉曼特征峰分析检测。

2.根据权利要求1所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，步骤1)中金-银双功能基底按如下方法制备得到：

a、多孔银丝的制备

将直径为0.15mm的银丝分别用丙酮、乙醇和超纯水超声清洗5-10min，以清洗后的银丝为工作电极，银/氯化银电极为参比电极，铂电极为对电极组成电极系统，将电极系统置于0.1mol/L的盐酸溶液中进行循环伏安扫描，对银丝进行刻蚀，取出后用超纯水冲洗3次，得到多孔银丝；

b、金-银双功能基底的制备：

以多孔银萃取丝为工作电极，银/氯化银电极为参比电极，铂电极为对电极组成三电极体系，将三电极体系置于KNO₃与HAuCl₄的混合溶液中，利用恒电压沉积350-450s，取出后用超纯水冲洗3次，得到金-银双功能基底。

3.根据权利要求2所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，步骤a中，循环伏安扫描时，电压为-0.2～0.2V，扫描15圈，扫描速度为10mV/s。

4.根据权利要求2所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，步骤b中，KNO₃与HAuCl₄的混合溶液中KNO₃的浓度为0.1mol/L，HAuCl₄的浓度为1mmol/L，恒电压为-0.4V。

5.根据权利要求1所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，步骤2)中，将带有基底的不锈钢中空管针扎入活体生物组织内时先用不锈钢中空管针尖头扎入活体生物组织内内，再将中空管外套向后回退，使管内的金-银双功能基底露出接触到活体生物组织内。

6.根据权利要求1所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，所述的不锈钢中空管针的外径为0.54-0.75mm，内径0.25-0.45mm，长度小于金-银双功能基底的长度，优选的，长度为3cm。

7.根据权利要求1所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，所述的不锈钢中空管针的外径为0.64mm，内径0.33mm。

8.根据权利要求1所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，步骤2)中，三苯甲烷类化学物为孔雀石绿、隐孔雀石绿或结晶紫，萃取时间为8-12min。

9.根据权利要求1所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，步骤3)中，激光照射的波长为785nm，激光功率为300mW，积分时间为1s。

10.根据权利要求1所述的快速原位检测活体生物组织内三苯甲烷类化学物的方法，其特征在于，步骤3)中，拉曼光谱仪为QE65000拉曼光谱仪。