[发明专利]一种同时检测多种目标物的生化分析方法

权利要求书

1.一种同时检测多种目标物的生化分析方法，其特征在于包括以下步骤：

1）以不同粒径和不同颜色的高分子微球为信号探针，将多种目标物的生物识别分子分别与不同粒径和不同颜色的信号探针偶联，每一种粒径和颜色对应一种目标物，同时以另一种大粒径的高分子微球为载体，将多种目标物对应的生物识别分子分别与载体偶联，将偶联有生物识别分子的信号探针和载体同时加入到待测样品进行生化反应；

2）将反应液通过毛细管或复合膜进行分离，收集含有未参与反应的信号探针的分离液；

3）将分离液滴加到划分网格的载玻片上，涂匀后盖上玻片，光学显微镜对焦后对不同网格的计数区域进行分别拍照，并将高清图像传送至计算机；

4）计算机对高清图像中的微球粒径和颜色进行区分，并在Python机器视觉识别和深度学习的基础上得出每一种粒径和颜色的高分子微球数量，最后根据每一种高分子微球的数量计算待测样品中不同种类目标物的含量，实现多种目标物的定量检测，

其中，所述作为信号探针的高分子微球其粒径小于毛细管或复合膜的孔径，所述作为载体的高分子微球其粒径大于毛细管或复合膜的孔径；所述作为信号探针的高分子微球其粒径为1~10 μm，所述作为载体的高分子微球其粒径为50~500 μm；所述毛细管或复合膜的孔径为10~50 μm；所述作为信号探针的不同粒径的高分子微球，它们的粒径倍数≥2，

所述目标物包括病毒、生物标志物、抗生素分子、农药分子、兽药分子、生物毒素、细菌。

2.如权利要求1所述同时检测多种目标物的生化分析方法，其特征在于：在将反应液通过毛细管进行分离时，还向反应液进行了施压和超声处理。

3.如权利要求2所述同时检测多种目标物的生化分析方法，其特征在于：所述超声功率为400-800 W，频率为10-50 kHz。

4.如权利要求1所述同时检测多种目标物的生化分析方法，其特征在于：所述复合膜由上、中、下三层组成，上层膜的孔径大于作为载体的高分子微球粒径；中层膜的孔径等于作为载体的高分子微球粒径；下层膜的孔径小于作为载体的高分子微球粒径。

5.如权利要求1所述同时检测多种目标物的生化分析方法，其特征在于：在将反应液通过毛细管或复合膜进行分离时，还对反应液进行了抽滤，所述抽滤的真空度≥0.08 Mpa。

6.如权利要求1所述同时检测多种目标物的生化分析方法，其特征在于：在将反应液通过复合膜进行分离时，所述反应液的体积与复合膜的直径比为20μL：1 mm。

7.如权利要求1所述同时检测多种目标物的生化分析方法，其特征在于：所述生化反应包括免疫竞争反应、免疫夹心反应或DNA分子杂交反应。