[发明专利]一种他克莫司软膏有关物质测定的前处理方法

权利要求书

1.一种他克莫司软膏有关物质测定的前处理方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）样品提取：称取适量他克莫司软膏于玻璃离心管中，加入正己烷-丙酮混合溶液，剧烈振荡至混悬完全后低温静置，再以4000r/min离心5min，取上清液，重复提取1次后，合并上清液；

（2）固相萃取柱分离：将步骤（1）所得上清液全部转移入固相萃取柱，再用正己烷-乙酸乙酯混合溶液进行淋洗，之后依次加入乙酸乙酯、乙腈进行洗脱，分别收集乙酸乙酯和乙腈的洗脱液并合并所有洗脱液，将其旋转蒸干，再在所得残留物中加入少量正己烷-正丁基氯-乙腈混合溶液，涡旋使残留物溶解后，所得溶液经微孔滤膜过滤后用于HPLC定性测定；

步骤（1）中所述低温静置的温度为-50~-5℃，时间为20-40min。

2.根据权利要求1所述的他克莫司软膏有关物质测定的前处理方法，其特征在于，步骤（1）中所用他克莫司软膏与正己烷-丙酮混合溶液的质量体积比为1g:5mL；

所述正己烷-丙酮混合溶液中正己烷与丙酮的体积比为5:1-15:1。

3.根据权利要求1所述的他克莫司软膏有关物质测定的前处理方法，其特征在于，步骤（2）所用正己烷-乙酸乙酯混合溶液与上清液的体积比为3:1；

所述正己烷-乙酸乙酯混合溶液中正己烷与乙酸乙酯的体积比为1:1-10:1。

4.根据权利要求1所述的他克莫司软膏有关物质测定的前处理方法，其特征在于，步骤（2）中用于洗脱的乙酸乙酯及乙腈与上清液的体积比均为1:2。

5.根据权利要求1所述的他克莫司软膏有关物质测定的前处理方法，其特征在于，步骤（2）所述正己烷-正丁基氯-乙腈混合溶液中正己烷、正丁基氯与乙腈的体积比为1:1:1。