[发明专利]一种从植物甾醇制备脱氧胆酸的方法

说明书

本发明提供了保藏编号为CCTCC NO：M 2020987的诱变菌种在制备脱氧胆酸中的应用。本发明提供了一种新的以植物甾醇为原料，通过生物发酵与化学合成相结合的手段，制备脱氧胆酸的方法，该方法未使用动物源提取，可以以工业废水废渣为原料，绿色环保；通过分支杆菌Mycobacterium sp.NRRL B‑3805诱变菌种生物发酵的方法在植物甾醇侧链一步构建胆酸类化合物的羰基侧链，操作简单，收率高，异构体杂质少，有机溶剂使用量少；通过本发明制备脱氧胆酸类化合物，反应试剂简单易得，反应条件温和，反应收率高，适合工业化大生产。

技术领域

本发明涉及化学制药技术领域，尤其涉及一种从植物甾醇制备脱氧胆酸的方法，具体涉及一种以植物甾醇为原料通过生物发酵与化学合成相结合的方式制备脱氧胆酸化合物的方法。

背景技术

脱氧胆酸(Deoxycholic Acid，简称DCA)又名去氧胆酸，化学名称为3α，12α-二羟-5β-胆烷酸，是胆酸失去一个氧原子而得的一种游离胆汁酸，在胆汁中主要以牛磺酸、甘氨酸结合形式存在。脱氧胆酸及其盐有表面活性，为化妆品和药剂中安全有效的乳化剂，有抗真菌和抗炎作用，可用于治疗牙根患疾。在皮肤外科中可用于皮脂腺分泌过多症的治疗。在香粉等制品中应用可除去多余皮脂和汗渍，而不使皮肤有干燥感。有研究显示，注入脂肪组织的脱氧胆酸盐经由细胞溶解机理降解脂肪细胞。由于注入脂肪的脱氧胆酸盐因暴露于蛋白质而快速失活，接着快速返回到肠内容物，所以其作用受空间限制。作为赋予临床安全性的此减弱作用的结果，脂肪去除疗法通常需要4-6疗程。此无需外科手术的局部脂肪去除不仅有利于与病理学局部脂肪沉积(例如HIV治疗中的医学介入易发的血脂异常)相关的治疗性处理，而且有利于美容脂肪去除且无外科手术(例如吸脂术)所固有的伴随风险。在美国，DCA已被FDA批准用于减少颏下中度至重度脂肪。

目前脱氧胆酸的制备方法主要有两种，一种是从生物体提取分离出来，但从动物来源获得的脱氧胆酸可能含有病原体；另一种是采用合成的方法获得脱氧胆酸，现有的合成方法工艺复杂，对环境污染，成本相对较高。近年来，有从植物甾醇为原料合成脱氧胆酸的相关报道，专利CN106146594A报道了以豆甾醇和麦角固醇为原料合成DCA的方法，该方法采用全合成方法，存在反应步骤长，收率低，试剂昂贵等问题，不适合工业化生产。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种从植物甾醇制备脱氧胆酸的方法，操作简单，收率高。

为达到上述目的，本发明提供了保藏编号为CCTCC NO：M 2020987的诱变菌种在制备脱氧胆酸中的应用。

本发明还提供了保藏编号为CCTCC NO：M 2020987的诱变菌种联合赭曲霉菌Aspergillus ochraceus ATCC 18500菌种在制备脱氧胆酸中的应用。

所述赭曲霉菌Aspergillus ochraceus ATCC 18500菌种的来源为美国模式菌种收集中心(ATCC)。

本发明还提供了保藏编号为CCTCC NO：M 2020987的诱变菌种联合保藏编号为CCTCC NO:M2013544的耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis NK-XHX-118菌种在制备脱氧胆酸中的应用。

上述保藏编号为CCTCC NO：M 2020987的诱变菌种为分支杆菌Mycobacteriumsp.NRRL B-3805的诱变菌种。

上述诱变菌种由分支杆菌NRRL B-3805为出发菌种，经诱变得到。

上述原始菌种分支杆菌NRRL B-3805的来源为美国农业研究菌种保藏中心(NRRL)。

本发明提供了用于生产4-胆烯酸-3-酮的分支杆菌诱变菌种的诱变方法，包括以下步骤：