[发明专利]一株多粘类芽孢杆菌及其菌剂的制备和应用

权利要求书

1.一株多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）DS-R5，其生物保藏号为：CCTCCNO：M 2021005。

2.一种微生物菌剂，其特征在于，以权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌（Paenibacilluspolymyxa）DS-R5为活性成分。

3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为液体微生物菌剂或固体微生物菌剂。

4.权利要求2或3所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）菌种活化：将权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌DS-R5划线接种于固体LB培养基平板上，置于培养箱中培养，待长出单菌落后挑取单菌落继续划线接种于固体LB培养基平板上，培养箱中培养得到活化的DS-R5菌苔；

（2）一级种子液制备：将步骤（1）活化的DS-R5菌苔接种于液体LB培养基中，摇瓶培养作为一级种子液；

（3）二级种子液制备：将步骤（2）得到的一级种子液按照2%的体积百分比接种并搅拌，发酵16h后作为二级种子液；

（4）液体菌剂制备：将步骤（3）得到的二级种子液按照5%的体积百分比接入发酵培养基并搅拌，发酵36h，得到液体微生物菌剂；

（5）固体菌剂制备：将步骤（4）得到的液体微生物菌剂经离心机离心，收集菌体后转移至搅拌器中，加入总重量5%的玉米粉作为载体基质，搅拌均匀后进行喷雾干燥，即为固体微生物菌剂。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，二级种子液制备中，发酵温度为37℃，通气量为3m³/h，罐压维持在0.05MPa；液体菌剂制备中，发酵温度为37℃，通气量为30m³/h，罐压维持在0.05MPa。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基配方：葡萄糖 10.0g，蛋白胨20.0g，(NH₄)₂SO₄ 2.0g，KH₂PO₄ 0.5g，MgSO₄ 1.0g，NaCl 1.5g，蒸馏水1L；121℃、0.1MPa条件下灭菌20min。

7.权利要求2或3所述的微生物菌剂的使用方法，其特征在于，液体微生物菌剂与水按照1:100的比例混合均匀，灌根施用；固体微生物菌剂按照5kg/亩用量，灌根施用。

8.权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）DS-R5或权利要求2~3中任一项所述的微生物菌剂在如下（1）-（4）至少一项中的应用：

（1）抑制植物病原菌；

（2）制备用于抑制植物病原菌的产品；

（3）防治由植物病原菌导致的药用植物根腐病；

（4）制备用于防治由植物病原菌导致的药用植物根腐病的产品；

上述（1）-（4）项应用中，所述植物病原菌为真菌；所述真菌为腐皮镰刀菌（F. solani）、立枯丝核菌（R. solani）、链格孢菌（A. alternata）、禾谷镰刀菌（F. graminearum）、尖孢镰刀菌（F. oxysporum）、假禾谷镰刀菌（F. pseudograminearum）、炭疽病菌（C. orbiculare）、 葡萄座腔菌（B. ribis）或白色念珠菌（Candida alibcans）。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药用植物为丹参、黄精、黄芪或板蓝根。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药用植物为丹参。