[发明专利]一种长丰鲢精准鉴定引物、鉴定方法及其应用

说明书

本发明属于水产生物品种鉴定技术领域，尤其涉及一种长丰鲢精准鉴定引物、鉴定方法及其应用。本发明提供的用于鉴定长丰鲢的引物分别为B25V31F2和B25V31R2，序列分别为B25V31F2：TCCTCTTGCTCAACATCTGGT；B25V31R2：CTGTTCCCTCTACTACTACCTTTT。本发明提供的方法简单易行，操作方便，鉴定成功率高，可以快速、高效、准确、批量对长丰鲢进行鉴定。

技术领域

本发明属于水产生物品种鉴定技术领域，尤其涉及一种长丰鲢精准鉴定引物、鉴定方法及其应用。

背景技术

鲢(Hypophthalmichthys molitrix)是我国重要的“四大家鱼”之一，广泛分布于我国的长江、珠江和黑龙江流域。鲢具有食物链短、易饲养、成本低和能调节水质等优点，已成为我国重要的淡水养殖种类之一，养殖产量持续位居淡水鱼类养殖产量的第二位，是我国重要的大宗淡水鱼类，在我国淡水渔业中具有举足轻重的地位。长丰鲢是中国水产科学研究院长江水产研究所自主选育的我国第一个鲢新品种(新品种证书：GS-01-001-2010)，采用人工雌核发育、分子标记辅助和群体选育相结合的综合育种技术培育而成。长丰鲢具有生长速度快，产量高、体型较高且整齐、适应性强、成活率高、纯合度高、遗传性状稳定等优良性状，适宜在全国范围的可控淡水中养殖，截止目前已经推广到了全国27个省市(自治区)。

长丰鲢外形特征跟普通鲢较为相似，普通苗种生产基地、养殖户仅通过外形难以准确鉴定长丰鲢和普通鲢个体。因此发明一种可以用于鉴定长丰鲢和普通鲢的方法尤其必要。长丰鲢新品种特异性分子标记的开发不仅有利于建立长丰鲢种质标准，保证种质的纯正，而且有利于苗种生产和养殖的健康发展，也有利于长丰鲢新品种的优良性状的维护和有效管理。同时对于保障长丰鲢种业的健康发展，维护种业地位具有重要作用。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种长丰鲢精准鉴定引物、鉴定方法及其应用，目的在于解决现有技术中的一部分问题或至少缓解现有技术中的一部分问题。该方法简单易行，操作方便，鉴定成功率高。

本发明是这样实现的，一种长丰鲢精准鉴定引物，所述引物为B25V31F2和B25V31R2，B25V31F2和B25V31R2的序列分别为B25V31F2：TCCTCTTGCTCAACATCTGGT；B25V31R2：CTGTTCCCTCTACTACTACCTTTT

一种长丰鲢精准鉴定方法，包括以下步骤：以引物B25V31F2和B25V31R2对样品DNA进行扩增，出现437bp大小条带即为长丰鲢样品；B25V31F2和B25V31R2的序列分别为B25V31F2：TCCTCTTGCTCAACATCTGGT；B25V31R2：CTGTTCCCTCTACTACTACCTTTT。

进一步地，对样品DNA进行扩增的PCR反应体系包括：2.5μL的10×PCR buffermix，上下游引物各0.5μL，1μL的模板，0.5μL的5U/μl Taq DNApolymerase，20μL的ddH₂O。

进一步地，对样品DNA进行扩增的PCR反应程序为95℃预变性5min，35个循环(95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸40s)，72℃延伸10min，4℃保存。

进一步地，扩增结束后，取2μL PCR扩增产物和2μL溴酚蓝混匀后进行电泳检测。

本发明还披露了上述的一种长丰鲢精准鉴定方法在长丰鲢品种鉴定中的应用。

综上所述，本发明的优点及积极效果为：

1、目前尚未见到长丰鲢特异性标记用于长丰鲢新品种的鉴定，具有原创性。

2、可以快速、高效、准确、批量对长丰鲢进行鉴定。

附图说明

图1是长丰鲢分子鉴定电泳结果；