[发明专利]一种长丰鲢精准鉴定引物、鉴定方法及其应用有效
申请号: | 202110142826.1 | 申请日: | 2021-02-02 |
公开(公告)号: | CN112725465B | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 梁宏伟;沙航;邹桂伟;李炯棠 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院长江水产研究所;中国水产科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 杨采良 |
地址: | 430000 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 长丰 精准 鉴定 引物 方法 及其 应用 | ||
1.一种区分长丰鲢和普通鲢的引物,其特征在于:所述引物为B25V31F2和 B25V31R2,B25V31F2和B25V31R2的序列分别为B25V31F2:TCCTCTTGCTCAACATCTGGT;B25V31R2:CTGTTCCCTCTACTACTACCTTTT。
2.一种区分长丰鲢和普通鲢的方法,其特征在于,包括以下步骤:以权利要求1中所述的引物对样品DNA进行扩增,出现437bp大小条带即为长丰鲢。
3.根据权利要求2所述的一种区分长丰鲢和普通鲢的方法,其特征在于,对样品DNA进行扩增的PCR反应体系包括:2.5 μL 的10×PCR buffer mix,上下游引物各0.5μL,1 μL的模板,0.5 μL的5U/μl
4.根据权利要求2所述的一种区分长丰鲢和普通鲢的方法,其特征在于,对样品DNA进行扩增的PCR反应程序为95℃预变性5 min;35个循环,包括95℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸40 s;72℃延伸10 min,4℃保存。
5.根据权利要求2所述的一种区分长丰鲢和普通鲢的方法,其特征在于:扩增结束后,取2 μL PCR扩增产物和2 μL溴酚蓝混匀后进行电泳检测。
6.如权利要求1所述的一种区分长丰鲢和普通鲢的引物在长丰鲢品种鉴定中的应用。
7.如权利要求2-5任一所述的一种区分长丰鲢和普通鲢的方法在长丰鲢品种鉴定中的应用。
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