[发明专利]一种应用斑马鱼鱼胚进行化妆品温和刺激性评价的方法

权利要求书

1.一种应用斑马鱼鱼胚进行化妆品温和刺激性评价的方法，包括以下步骤：

将待测化妆品和20～72hpf的斑马鱼鱼胚混合，观察并统计鱼胚刺激情况，实现化妆品温和刺激性评价；以斑马鱼系统养殖水或蒸馏水或PBS为空白对照，以十二烷基硫酸钠或脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠或氢氧化钠为阳性对照；所述观察的指标包括鱼胚摆尾和鱼胚死亡或者凝结；空白对照组观察鱼胚应无死亡或者凝结；阳性对照组观察鱼胚应100％死亡或者凝结。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述斑马鱼鱼胚包括野生AB型斑马鱼鱼胚。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述观察的时间为0.5～10min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述评价的方法包括：当无鱼胚摆尾且无鱼胚凝结时，判定为无刺激性；当所述混合后0.5～10min，无鱼胚死亡或者凝结，或鱼胚死亡率和凝结率之和＜50％，但与空白对照组相比无显著性差异时判定为无刺激性；当所述混合后0.5～10min，鱼胚摆尾小于空白对照，且与空白对照相比无显著性差异，判定为无刺激性；

当所述混合后0.5～10min，鱼胚死亡率和凝结率之和＜50％，与空白对照组相比有显著性差异且当所述混合后0.5～10min，鱼胚摆尾小于空白对照，且与空白对照相比无显著性差异时判定为轻微刺激性；

当所述混合后0.5～10min，鱼胚死亡率和凝结率之和＞50％，与鱼胚死亡率和凝结率之和＝50％组相比无显著性差异和/或当所述混合后0.5～10min，鱼胚摆尾与空白对照或阳性对照相比有显著性差异时判定为轻度刺激性；

当所述混合后0.5～10min，鱼胚死亡率和凝结率之和＝50％；或鱼胚死亡率和凝结率之和＞50％，与阳性对照组相比有显著性差异且当所述混合后0.5～10min，鱼胚摆尾与空白对照或阳性对照相比有显著性差异时判定为中度刺激性；

当所述混合后0.5～10min，鱼胚死亡率和凝结率之和＝100％；或鱼胚死亡率和凝结率之和＞50％，与阳性对照组相比无显著性差异且当所述混合后0.5～10min，鱼胚摆尾与空白对照或阳性对照相比有显著性差异时，判定为强刺激性。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述化妆品包括化妆品原料和/或化妆品成品。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测化妆品包括待测化妆品水溶液。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述斑马鱼鱼胚自受精起发育至20～72hpf的培养条件包括温度：27.5℃±1℃；酸碱度：pH＝6.8；光照：白昼14h，黑夜10h。