[发明专利]非抗生素化合物诱导细菌产生抗生素耐药性的评价方法及应用

说明书

本发明涉及生物领域，具体讲，涉及一种非抗生素化合物诱导细菌产生抗生素耐药性的评价方法及应用。包括以下步骤：将某浓度待测非抗生素化合物与菌株编号为ATCC 700926的大肠杆菌共同培养后得到培养物；如果产生氯霉素抗性突变子，则判定待测非抗生素化合物在该浓度下可诱导细菌产生抗生素多重耐药性。本发明首创一种非抗生素化合物诱导细菌产生抗生素耐药性的评价方法，操作简便，准确率高。

技术领域

本发明涉及生物领域，具体讲，涉及一种非抗生素化合物诱导细菌产生抗生素耐药性的评价方法及应用。

背景技术

抗生素耐药菌问题日趋严重，已成为全球关注的公共安全问题，对人类健康造成了极大的危害。世界卫生组织公布了2019年全球健康面临的最大威胁清单，其中，细菌的抗生素耐药性问题位列第五，而也有科学家指出，到2050年，抗生素耐药菌感染每年会导致1000万人死亡，并可能会成为全球引起死亡的主要原因。同时，抗生素耐药菌在环境中的产生和传播也日益成为世界上新近出现的最大环境问题之一。

传统观点认为，抗生素长期暴露是诱导细菌产生抗生素耐药性的主要化合物，但近年来，越来越多研究表明，大量非抗生素化合物，包括环境污染物和人畜服用的非抗生素药物等在一定浓度下也可诱导细菌产生抗生素耐药性。为有效控制抗生素耐药菌的产生和传播，必须首先发现环境和日常生活中促进细菌产生抗生素耐药性的风险化合物，才能采取有效措施控制这些化合物带来的风险。目前，判断一种非抗生素化合物是否能够诱导细菌产生多重抗生素耐药性，主要依靠最低抑菌浓度测定，或多种抗生素平板逐一进行筛选。然而，环境和日常生活中的化合物种类繁多，数以万计，采用最低抑菌浓度测定或盲筛方法不仅工作量大，而且方法不敏感，容易判断错误。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的首要发明目的在于提供一种非抗生素化合物诱导细菌产生抗生素耐药性的评价方法。

本发明的第二发明目的在于提供该评价方法的应用。

为了完成本发明的发明目的，采用的技术方案为：

本发明涉及一种非抗生素化合物诱导细菌产生抗生素多重耐药性的评价方法，包括以下步骤：将某浓度待测非抗生素化合物与菌株编号为ATCC 700926的大肠杆菌共同培养后得到培养物；

如果所述培养物对氯霉素产生氯霉素抗性突变子，则判定所述待测非抗生素化合物在所述浓度下可诱导细菌产生抗生素多重耐药性；

如果所述培养物对氯霉素不产生氯霉素抗性突变子，则判定所述待测非抗生素化合物在所述浓度下不诱导细菌产生抗生素多重耐药性。

可选的，将不同浓度的所述待测非抗生素化合物与所述大肠杆菌共同培养后得到培养物；

如果某特定浓度的所述待测非抗生素化合物培养后得到培养物对氯霉素产生氯霉素抗性突变子，则判定所述待测非抗生素化合物可诱导细菌产生抗生素多重耐药性，同时所述特定浓度为产生抗生素多重耐药性的风险浓度。

可选的，所述评价的过程在具有多个孔的孔板上进行，优选96孔板或384孔板。

可选的，所述待测非抗生素化合物的浓度范围为0.01～200mg/L。

可选的，所述培养包括首次培养和二次培养两个步骤：

所述首次培养为将所述大肠杆菌与所述待测非抗生素化合物，在36～37℃培养18～30小时，优选37℃培养24小时；

所述二次培养为吸取首次培养的培养物，然后依次加培养基和所述待测非抗生素化合物，在36～37℃培养18～30小时，优选37℃培养24小时。