[发明专利]一种颈痛颗粒中羌活醇、异欧前胡素和/或齐墩果酸的检测方法

说明书

本发明具体涉及一种颈痛颗粒中羌活醇、异欧前胡素或齐墩果酸的检测方法。颈痛颗粒是国内首个治疗神经根型颈椎病的国家级新药，由三七、川芎、延胡索、羌活、白芍、威灵仙、葛根七味药制成，现有检测方法缺乏对其中羌活及威灵仙中有效成分进行测定的方法。本发明提供了一种针对颈痛颗粒中羌活醇、异欧前胡素或齐墩果酸进行检测的方法，该方法能够实现上述三种成分的良好分离效果，对于颈痛颗粒的质量控制具有重要的意义。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种颈痛颗粒中羌活醇、异欧前胡素和/或齐墩果酸的检测方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

颈痛颗粒根据孙树椿教授的组方制成，是国内首个专业治疗神经根型颈椎病的国家级新药、山东省自主创新产品、国家重点新产品。该药由三七、川芎、延胡索、羌活、白芍、威灵仙、葛根七味药制成，其中三七、川芎、延胡索起到活血行气、散瘀通络的作用；羌活、威灵仙、葛根有祛风寒湿邪外出、缓解颈项强紧的功效；而白芍则着力于养血柔阴、濡养筋脉，主要功效是“活血化瘀、行气止痛”，用于神经根型颈椎病属血瘀气滞、脉络闭阻证。

发明专利《一种颈痛颗粒指纹图谱的建立方法及应用》(专利公布号CN111999423A)公布了一种颈痛颗粒指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。针对颈痛颗粒作为一种中药复方制剂，由7味处方药材组成、成分复杂多样、且尚未完全明确等特点，通过研究试验，进一步对颈痛颗粒中特征性成分有效分离，使其形成特征峰多且能够有效表征颈痛颗粒制剂质量的指纹图谱，但未对其中有效成分进行含量测定。

2020年版《中华人民共和国药典》(一部)仅采用薄层色谱法结合对照品延胡索乙素、紫花前胡苷、芍药苷等和对照药材川芎对颈痛颗粒进行鉴别，或采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rg 1、人参皂苷Rb 1和三七皂苷R1的含量，质控指标单一，不能全面反映中药方剂多成分、多靶点的特点。

发明专利《一种治疗神经根型颈椎病的中药制剂的检测方法》(专利公布号CN105929080B)公开了一种治疗神经根型颈椎病的中药制剂的含量检测方法。该方法通过高效液相色谱法进行测定，包括川芎的含量测定、白芍的含量测定、葛根的含量测定，但未对羌活和威灵仙进行含量控制。

发明专利《一种羌活配方颗粒及制备方法和质量控制方法》(专利公布号CN101474224)公开了一种羌活配方颗粒及其制备方法和质量控制方法，采用红外指纹图谱进行质量鉴别，无含量测定。

综上所述，现有技术中无能够准确测定颈痛颗粒中羌活、威灵仙成分含量的方法。

发明内容

针对上述研究背景，本发明目的在于提供一种针对颈痛颗粒中主要活性成分进行测定的方法，用于实现对颈痛颗粒质量的控制作用。本发明选择羌活醇、异欧前胡素及齐墩果酸作为检测目标，并针对上述物质提供了一种稳定可靠的检测方法。

基于上述技术目的，本发明提供以下技术方案：

本发明第一方面，提供一种颈痛颗粒中羌活醇、异欧前胡素、齐墩果酸的检测方法，所述检测方法包括样品前处理及检测过程；所述样品前处理采用固相萃取方法制备待测样品，所述检测通过高效液相进行梯度洗脱分离待测样品，所述梯度洗脱程序如下：

0～15min，56％A→56％A；15～29min，56％A→10％A；29～39min，10％A→10％A；39～39.1min，10％A→56％A；39.1～55min，56％A→56％A。