[发明专利]用于犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的试剂盒及方法

权利要求书

1.用于犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的试剂盒，包括试剂盒本体(1)、盒盖(2)、第一限位板(3)、第二限位板(4)、通孔(5)、限位槽(6)和试剂管(7)，其特征在于：所述试剂盒本体(1)的顶端外壁上设置有盒盖(2)，所述试剂盒本体(1)的一侧内壁上固定连接有第一限位板(3)，所述试剂盒本体(1)的底端内壁上固定连接有第二限位板(4)，所述第一限位板(3)的一侧外壁上分布贯通开设有通孔(5)，所述通孔(5)的一侧内壁上插接有试剂管(7)，且试剂管(7)的一端插接于限位槽(6)的一侧内壁上。

2.用于犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的试剂盒的方法，包括以下步骤，步骤一，样品获取；步骤二，样品初处理；步骤三，样品分析；步骤四，记录分析；其特征在于：

其中上述步骤一中，取适量犬的血液样本，经过洗涤、离心处理后，获得犬的外周血作为检测样本；

其中上述步骤二中，样品初处理包括以下步骤：

1)将取得的犬外周血于肝素钠的抗凝管中进行抗凝处理；

2)取100μl的血液于流式管中，分别加入试剂盒本体(1)中的CD45、CD5、CD4、CD8、CD21抗体，并孵育30分钟；

其中上述步骤三中，样品分析包括以下步骤；

1)加入2ml红细胞裂解液，旋涡震荡混匀并于室温避光裂解红细胞，进行离心处理，去除上清液，并用磷酸盐缓冲液洗涤一次；

2)加入500μl上样缓冲液，用流式细胞仪分析步骤二中得到的淋巴细胞，通过CD45表达情况分析粒细胞群体；

3)再以CD45+CD5+和CD45+CD21+分别分析T淋巴细胞和B淋巴细胞亚群，结合其比值的变化反应整体免疫功能。

其中上述步骤四中，记录分析包括以下步骤；

1)记录通过步骤三的处理后犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的所有信息；

2)通过上述信息对比研究来揭示犬瘟热病犬与正常健康犬在这方面的差异，从而揭示病毒感染致犬类伴侣动物体内免疫功能的变化规律，为临床诊断及干预疗效提供方便。

3.根据权利要求1所述的用于犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的试剂盒，其特征在于：所述试剂管(7)的数量为十个。

4.根据权利要求1所述的用于犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒本体(1)中包含以下5种抗体：CD45、CD5、CD4、CD8、CD21。

5.根据权利要求4所述的用于犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的试剂盒，其特征在于：所述上述的5种指标抗体各自由5种不同类型的荧光标记物标记。

6.根据权利要求5所述的用于犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的试剂盒，其特征在于：所述上述5种荧光标记物选自：FITC、PE、Per-CP、PE-CY5.5、PE-CY7、APC、APC、PE-CF594、BV421、BV450、BV500、BV510、BV605、BV650和APC-cy7等。

7.根据权利要求2所述的用于犬类伴侣动物TB淋巴细胞亚群及免疫功能的试剂盒的方法，其特征在于：所述步骤二2)中，在4℃的温度环境下孵育30分钟。