[发明专利]一个倍半萜类化合物的制备及其协同氟康唑抗耐药真菌应用

说明书

本发明提供了本发明提供了一个倍半萜类化合物，该化合物从中药毛梗豨莶中提取：毛梗豨莶地上部位干粉先用95％乙醇浸提、浓缩得到粗浸膏，再用乙酸乙酯萃取，萃取物以甲醇‑水体系过MCI树脂柱层析，其中组分分别以氯仿‑甲醇、石油醚‑乙酸乙酯体系过正相硅胶柱层析，最后通过高效液相色谱ODS柱和手性柱进行分离纯化后得到。评价白色念珠菌对这个化合物的体外敏感性，并观察与氟康唑合用对白色念珠菌耐药菌株(28A)的联合抗真菌作用。本发明为有效的控制真菌感染，研发新型的抗真菌药物奠定了物质基础，有利于毛梗豨莶药用价值的进一步的开发。

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，涉及一个倍半萜类化合物的制备方法及其在协同氟康唑抗耐药真菌中的应用。

背景技术

植物药一直是天然药物的重要来源，也是人类防病治病的主要来源。真菌感染的发病率呈逐年上升趋势，并且临床上真菌耐药时有发生，促使人们将希望寄托于寻找新型的天然抗菌药物，以期发现疗效更好或具有新靶点的药物先导化合物。因此，开发安全高效的新类型抗耐药真菌药物的工作是当今药物研发领域的重要攻关方向之一。天然产物的结构多样性和易于与生物大分子结合的特点，决定了其在参与生命生理过程中所具有的无可比拟的优势，这些都赋予了天然产物在新药研发中不可替代的重要地位，是发现药物先导结构和候选药物的重要来源。中药豨莶作为一种重要的中药资源，其次级代谢产物已经被报道具有多种结构类型以及多样的生物活性。因此，从豨莶中挖掘的具有抗真菌活性的代谢产物对于有效的控制真菌感染具有重要意义。能为研发新型抗真菌药物奠定基础，并为今后临床上合理使用抗真菌药物和探索抗真菌药物未来的研究趋势提供策略指导和理论支持，鉴于此，我们提出一个倍半萜类化合物的制备及其协同氟康唑抗耐药真菌应用。

发明内容

为了进一步发掘毛梗豨莶的药用价值，本发明提供一个从毛梗豨莶中提取的倍半萜，具有协同氟康唑抗耐药真菌活性。

本发明的另一目的是提供一种上述倍半萜的制备方法。

本发明的再一目的是提供一种上述倍半萜在抗真菌方面的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一个倍半萜类化合物，其结构如式(Ⅰ)所示：

所述倍半萜类化合物的结构类型为clovane-2β,9β-diol。

上述的一个倍半萜类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)毛梗豨莶干燥地上部位，粉碎后用95％乙醇浸提，浸提液浓缩得到粗浸膏；

(2)粗浸膏悬浮于水中，然后用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后得到乙酸乙酯萃取物；

(3)将乙酸乙酯萃取物过MCI树脂柱层析，用50％–85％v/v的甲醇-水洗脱得到主要洗脱成分；

(4)将上述MCI柱层析洗脱成分过正相硅胶柱层析，依次用100:1、50:1、20:1、8:1、1:1v/v的氯仿-甲醇洗脱，得到5个组分Fr.1–Fr.5：

(5)将组分Fr.4过正相硅胶柱层析，用8:1v/v的石油醚-乙酸乙酯洗脱得到组分Fr.4.1–Fr.4.3；

(6)将组分Fr.4.2经高效液相YMC-pack ODS-A色谱柱，用74％v/v的甲醇-水洗脱，检测波长为210nm，收集保留时间为12min的组分，得到上述倍半萜类化合物纯品。

优选的，步骤(1)中，所述毛梗豨莶与95％乙醇的料液比为1:2–3(w/v)。

优选的，步骤(1)中，所述毛梗豨莶粉碎至粒度直径小于3mm。

优选的，步骤(1)中，所述浸提次数为3次，每次时间为7天。