[发明专利]一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法

权利要求书

1.一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是包括下列步骤：

a、制备纵条纹炭角菌上样液：

取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20 mL体积百分比浓度为60～95%乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为60～95%乙醇水溶液混合并在60～85℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～4次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；

b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：

1）D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为80～95%乙醇水溶液浸泡15～30h，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5%的盐酸水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2%的氢氧化钠水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；

2）动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0010～0.0070g/mL的上样液50～300mL，以1～5BV/h的体积流量动态吸附；

c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：

待动态吸附平衡后，停止加入上样液，用体积百分比浓度为10～50%的乙醇水溶液洗脱1～5BV后，再用体积百分比浓度为60～100%的乙醇水溶液洗脱1～5BV，以1～5BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。

2.按权利要求1所述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是：步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20 mL体积百分比浓度为75～95%乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为75～95%乙醇水溶液混合并在70～80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～3次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用。

3.按权利要求2所述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是：步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20 mL体积百分比浓度为90%乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为90%乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～2次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用。

4.按权利要求1、2或3所述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是：步骤b所述树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附是：

1）D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为95%乙醇水溶液浸泡24h，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5%的盐酸水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2%的氢氧化钠水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；

2）动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0030g/mL的上样液210mL，以2BV/h的体积流量动态吸附。