[发明专利]一种细胞内5-醛基尿嘧啶的可视化分析方法及系统有效
| 申请号： | 202110114120.4 | 申请日： | 2021-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN112708661B | 公开（公告）日： | 2022-07-12 |
| 发明（设计）人： | 陈锋;赵永席;白敏 | 申请（专利权）人： | 西安交通大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 710049 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞内 醛基尿 嘧啶 可视化 分析 方法 系统 | ||
1.一种细胞内5-醛基尿嘧啶的可视化分析方法，其特征在于，包括：
封闭细胞内自身存在的5-羟甲基尿嘧啶；
将细胞内的5-醛基尿嘧啶还原为5-羟甲基尿嘧啶；
通过特异性酶识别和点击化学反应将DNA引物连接到5-羟甲基尿嘧啶上，具体操作如下：利用5-羟甲基尿苷DNA激酶将ATP-γ-炔基结合在5-羟甲基尿嘧啶位点上，再通过点击化学反应将DNA引物连接到新生成的5-羟甲基尿嘧啶上；
通过滚环扩增放大荧光信号，实现细胞内5-醛基尿嘧啶的单分子可视化分析。
2.根据权利要求1所述的细胞内5-醛基尿嘧啶的可视化分析方法，其特征在于，封闭细胞内自身存在的5-羟甲基尿嘧啶是利用5-羟甲基尿苷DNA激酶将ATP结合在5-羟甲基尿嘧啶位点上。
3.根据权利要求1所述的细胞内5-醛基尿嘧啶的可视化分析方法，其特征在于，采用硼氢化钠将细胞内5-醛基尿嘧啶还原为5-羟甲基尿嘧啶。
4.根据权利要求1所述的细胞内5-醛基尿嘧啶的可视化分析方法，其特征在于，ATP-γ-炔基是利用ATP和丙胺合成。
5.一种细胞内5-醛基尿嘧啶的可视化分析系统，其特征在于，包括：
5-羟甲基尿嘧啶封闭模块，用于封闭细胞内自身存在的5-羟甲基尿嘧啶；
5-羟甲基尿嘧啶还原模块，用于将细胞内5-醛基尿嘧啶还原为5-羟甲基尿嘧啶；
DNA引物连接模块，用于利用5-羟甲基尿苷DNA激酶将ATP-γ-炔基结合在5-羟甲基尿嘧啶位点上，再通过点击化学反应将DNA引物连接到新生成的5-羟甲基尿嘧啶上；
荧光信号放大模块，用于通过滚环扩增放大荧光信号，实现细胞内5-醛基尿嘧啶的单分子可视化分析。
6.根据权利要求5所述的细胞内5-醛基尿嘧啶的可视化分析系统，其特征在于，所述5-羟甲基尿嘧啶封闭模块是利用5-羟甲基尿苷DNA激酶将ATP结合在5-羟甲基尿嘧啶位点上。
7.根据权利要求5所述的细胞内5-醛基尿嘧啶的可视化分析系统，其特征在于，ATP-γ-炔基是通过ATP和丙胺合成。
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