[发明专利]用于体外评价新型冠状病毒ADE效应的系统及其构建方法

权利要求书

1.一种用于体外评价新型冠状病毒ADE效应的系统，其特征在于，所述系统包括免疫球蛋白IgG受体FcγR的表达细胞、含新型冠状病毒抗体的溶液和新型冠状病毒假病毒；所述细胞为表达ACE2的Huh7细胞；

其中，所述免疫球蛋白IgG受体FcγR为FcγRIIA，即CD32A；

新型冠状病毒抗体促进新型冠状病毒假病毒感染免疫球蛋白IgG受体FcγR CD32A的表达细胞；

根据上述系统评价待测新型冠状病毒或新型冠状病毒抗体的ADE效应；

所述新型冠状病毒假病毒为HIV/SARS-CoV-2。

2.如权利要求1所述的用于体外评价新型冠状病毒ADE效应的系统，其特征在于，

所述含新型冠状病毒抗体的溶液为抗血清或康复者血浆。

3.一种用于体外评价新型冠状病毒ADE效应的系统的构建方法，其特征在于，所述方法包括：构建免疫球蛋白IgG受体FcγR的表达细胞，获得含新型冠状病毒抗体的溶液以及新型冠状病毒假病毒；其中，所述免疫球蛋白IgG受体FcγR为FcγRIIA，即CD32A；所述新型冠状病毒假病毒为HIV/SARS-CoV-2，所述细胞为表达ACE2的Huh7细胞。

4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，

构建稳定表达CD32A细胞系的方法包括：

根据CD32A的基因序列合成CD32A的编码基因；

将所述CD32A的编码基因替换pLenti-Cas9-Blast载体XbaI/BamHI位点中的Cas9基因，得到pLenti-CD32A-Blast载体；

将所述pLenti-CD32A-Blast载体、pVSVG、pLP1和pLP2共转染至293T细胞；

将获得的共转染的293T细胞上清感染Huh7细胞，筛选得到免疫球蛋白IgG受体FcγRCD32A的表达细胞。

5.如权利要求4所述的构建方法，其特征在于，

所述共转染的体系为：1.5 μg pVSVG、2 μg pLP1、2 μg pLP2和5 μg pLenti- CD32A-Blast载体共同转染至2.5×10⁶ 293T细胞。