[发明专利]一种2’-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法

权利要求书

1.一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法，其特征在于：由如下步骤组成：

1)制备一级种子发酵液：取-80冰箱冻藏甘油株大肠杆菌，按体积百分比1-5％接种量接种于LB培养基中，37℃220rpm摇床培养4-8h；

2)制备二级种子发酵液：取一级种子发酵液按5-10％接种量接种于LB培养基中，37℃220rpm摇床培养3-6h；

3)分批发酵：配制培养基灭菌后，按10-20％接种量取二级种子发酵液接种，37℃400-600rpm搅拌，通气0.8-1.5vvm，恒定pH 7.0，发酵4-6h后加入诱导剂0.2mM，随后温度设置为30℃，搅拌速度降为300-400rpm，通气量降至0.5-1vvm，添加诱导剂2-4h后添加底物乳糖至10-15g/L，添加消泡剂0.05mL/L，持续发酵96h后结束。

2.根据权利要求1所述一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法，其特征在于：所述分批发酵在摇瓶或发酵罐中完成。

3.根据权利要求1所述一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法，其特征在于：所述诱导剂是IPTG。

4.根据权利要求1所述一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法，其特征在于：所述大肠杆菌为大肠杆菌E.coli-XYY1。

5.根据权利要求1所述一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法，其特征在于：所述消泡剂为聚二甲基硅氧烷。

6.根据权利要求1所述一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法，其特征在于：分批发酵中步骤(3)配制的培养基具体配方如下：

其中，酵母浸粉、蛋白胨、葡萄糖、MgSO₄、CaCl₂、甲硫氨酸需要单独分消后补入发酵罐。

7.根据权利要求6所述一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法，其特征在于：微量元素溶液如下：

8.根据权利要求6所述一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法，其特征在于：金属溶液如下：

9.根据权利要求1所述一种2'-岩藻糖基乳糖的分批发酵方法制得4-10g/L的2'-岩藻糖基乳糖。