[发明专利]抗细胞内细菌感染的抗菌药物药效评估方法及其应用有效
| 申请号： | 202110106910.8 | 申请日： | 2021-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN112877397B | 公开（公告）日： | 2022-04-22 |
| 发明（设计）人： | 黄建永;刘晓晔 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 任岩 |
| 地址： | 100871*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞内 细菌 感染 抗菌 药物 药效 评估 方法 及其 应用 | ||
1.一种抗细胞内细菌感染的抗菌药物体外药效评估方法，其特征在于，包括：
基于细胞感染百分比
根据抗菌药物药效指数ρ值对抗菌药物的药效进行评估，当ρ值越趋近于1时，表明药效越好；
其中，所述基于细胞感染百分比
细菌侵染细胞后，定量分析细胞感染百分比
加入抗菌药物后，定量分析药物治疗后细胞感染百分比 QUOTE，并定量统计药物治疗后细胞内细菌入侵总量 QUOTE ；
计算药物治疗后归一化的细胞感染百分比 QUOTE 和药物治疗后归一化的细胞内细菌入侵总量 QUOTE ；
计算药物治疗前后的细胞感染百分比差值 QUOTE 和细胞内细菌入侵总量差值 QUOTE；以及
采用公式QUOTE 计算得到抗菌药物药效指数ρ值；
其中，所述定量分析细胞感染百分比
所述定量统计细胞内细菌入侵总量
该方法在细菌侵染细胞后，定量分析细胞感染百分比
采用聚丙烯酰胺水凝胶形成软基底和硬基底；
在软基底和硬基底上分别接种定量的上皮细胞细胞系，然后用病原菌侵染上皮细胞细胞系一段时间t1后，用抗生素清除掉细胞外未入侵的细菌。
2.根据权利要求1所述的抗细胞内细菌感染的抗菌药物体外药效评估方法，其特征在于，
所述上皮细胞细胞系为大鼠肠隐窝上皮细胞系IEC-6；
所述病原菌为分泌肠毒素的蜡样芽孢杆菌；
所述用病原菌侵染上皮细胞细胞系一段时间t1中，t1为1.5至2.5小时；
所述抗生素为庆大霉素。
3.根据权利要求2所述的抗细胞内细菌感染的抗菌药物体外药效评估方法，其特征在于，所述细菌侵染细胞后，定量分析细胞感染百分比
采用流式细胞术的方法定量分析IEC-6细胞的感染百分比
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