[发明专利]一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台制备方法有效
| 申请号: | 202110103824.1 | 申请日: | 2021-01-26 |
| 公开(公告)号: | CN112945954B | 公开(公告)日: | 2022-08-09 |
| 发明(设计)人: | 胡琼政;武文丽;夏爽 | 申请(专利权)人: | 山东省分析测试中心 |
| 主分类号: | G01N21/84 | 分类号: | G01N21/84 |
| 代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 郑平 |
| 地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 利用 催化 诱导 适配体 释放 筛选 抑制剂 通量 液晶 检测 平台 制备 方法 | ||
1.一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,包括:
将载体进行预处理;
在预处理的载体上负载铜网;
将表面活性剂与液晶混合形成混合物,并转移至所述铜网上;
将待测抑制剂药物与底物转化特异性酶混合,孵育,再加入底物,孵育后,加入适配体DNA孵育,即得待测物溶液;
将所述待测物溶液滴加到铜网上,并用偏光显微镜观察其形貌;
所述的筛选获得的黄嘌呤氧化酶有效抑制剂的分子,其特征在于,结构式如下:
2.如权利要求1所述的一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台的制备方法,包括:
将载体进行预处理;
在预处理的载体上负载铜网;
将表面活性剂与液晶混合形成混合物,并转移至所述铜网上;
将待测抑制剂药物与底物转化特异性酶混合,孵育,再加入底物,孵育后,加入适配体DNA孵育,即得待测物溶液;
将所述待测物溶液滴加到铜网上,即得。
3.如权利要求1所述的一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台,包括:液晶分子、铜网、表面活性剂、小分子底物、底物适配体、底物转化特异性酶、载体;
所述载体负载有铜网;
所述铜网上依次附着有液晶分子和表面活性剂的混合物、待测制药物与底物转化特异性酶、小分子底物、适配体DNA的混合物;
其中,所述小分子底物与适配体DNA特异性结合;
底物转化特异性酶诱导适配体-特异性底物复合物的断裂。
4.如权利要求3所述的一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,所述载体为硅烷化处理后的载玻片。
5.如权利要求3所述的一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,所述待测制药物为非布索坦、苯三唑类化合物及其衍生物、司来吉兰中至少一种。
6.如权利要求3所述的一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,所述小分子底物为黄嘌呤,黄嘌呤的适配体编码DNA的核苷酸序列为:
5′-AGCTTATTCAATTACACGACGCTCTTCCGATCTAGATTGC-3′;
或,所述小分子底物为多巴胺,所述多巴胺的适配体编码DNA的核苷酸序列为:
5-GTCTCTGTGTGCGCCAGAGAACACTGGGGCAGATATGGGCCAGCACAGAATGAGGCCC-3。
7.如权利要求3所述的一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,所述液晶为5CB或E7。
8.如权利要求3所述的一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,所述表面活性剂为OTAB、CTAB、SDS、SMP中的至少一种。
9.如权利要求3所述的一种利用酶催化诱导适配体释放筛选酶抑制剂的高通量液晶检测平台筛选抑制剂的方法,其特征在于,所述表面活性剂溶液的最佳适用浓度为80~120μM。
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