[发明专利]一种萎缩性肌强直蛋白激酶基因CTG区域的PCR检测试剂盒及应用在审
| 申请号： | 202110103251.2 | 申请日： | 2021-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN114790478A | 公开（公告）日： | 2022-07-26 |
| 发明（设计）人： | 吴群峰;杜雪柯;许程;窦同海 | 申请（专利权）人： | 上海昂朴生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 上海华工专利事务所(普通合伙) 31104 | 代理人： | 赵孟琴;缪利明 |
| 地址： | 201114 上海市闵*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 萎缩 强直 蛋白激酶 基因 ctg 区域 pcr 检测 试剂盒 应用 | ||
1.一种萎缩性肌强直蛋白激酶基因CTG区域的PCR检测试剂盒，其特征在于，包括核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的特异性引物对。
2.如权利要求1所述的PCR检测试剂盒，其特征在于，还包括反应体系，所述反应体系为25μL，包括2×GC BufferⅡ5μL，2.5mM dNTP 3μL，10ng DNA样本1μL，TaKaRa La Taq DNA聚合酶0.5μL，10μM的特异性引物对各1μL，余量为水。
3.如权利要求1所述的PCR检测试剂盒，其特征在于，还包括扩增程序：94℃变性60s；进入循环，94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸1.5min，共35个循环；72℃延伸10min，4℃保持温度不变。
4.一种如权利要求1-3任一项所述的萎缩性肌强直蛋白激酶基因CTG区域的PCR检测试剂盒用于检测萎缩性肌强直蛋白激酶基因CTG区域的CTG三碱基重复次数。
5.一种萎缩性肌强直蛋白激酶基因CTG区域的扩增方法，其特征在于，包括如下步骤：
第一步，以待测样品的DNA为模板，进行PCR扩增，获得PCR扩增产物；
第二步，观察扩增产物的电泳结果，若电泳图中存在双条带，则表明所述PCR方法可以同时扩增大片段和小片段；
其中，扩增用的特异性引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。
6.如权利要求5所述的扩增方法，其特征在于，还包括第三步、计算待测样品中的CTG的重复次数。
7.如权利要求5所述的扩增方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系为25μL，包括2×GC BufferⅡ5μL，2.5mM dNTP 3μL，10ng DNA样本1μL，TaKaRa La Taq DNA聚合酶0.5μL，10μM的特异性引物对各1μL，余量为水。
8.如权利要求5所述的扩增方法，其特征在于，所述PCR扩增的扩增程序为：94℃变性60s；进入循环，94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸1.5min，共35个循环；72℃延伸10min，4℃保持温度不变。
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