[发明专利]一种缺血性脑卒筛查试剂盒及制备方法

说明书

本发明属于试剂盒制备技术领域，公开了一种缺血性脑卒筛查试剂盒及制备方法，所述缺血性脑卒筛查试剂盒包括试剂盒壳体、PCR组件、产品说明书；所述试剂盒壳体包括上壳体与下壳体；所述PCR组件包括PCR反应组件、PCR产物纯化组件、PCR测序组件。本发明建立了进行PCR扩增、纯化及测序的方法，能够实现对缺血性脑卒标记物的精确获取，并且进行PCR检测的方案更简便，只需要进行血液的处理、试剂盒的反应和反应后的测序即可实现，比现行实验室PCR扩增的方法程序更为便捷。本发明的试剂盒设计合理，能够得到缺血性脑卒发生风险的预测，实现缺血性脑卒筛选，降低筛选成本。

技术领域

本发明属于试剂盒制备技术领域，尤其涉及一种缺血性脑卒筛查试剂盒及制备方法。

背景技术

目前：根据世界卫生组织(WHO)公布的资料显示，脑卒中是全球威胁人类健康的重大疾病之一，是目前首要的致残和仅次于癌症和心血管疾病的第三大致死性疾病。流行病学显示，脑卒中发病呈年轻化和逐年递增的趋势。脑卒中根据病因的不同主要分为缺血性和出血性脑卒中，其中缺血性脑卒中占87％。研究揭示影响脑卒中发生、发展的主要病理机制包括能量代谢障碍、神经元的过度去极化、兴奋性毒性损伤、离子稳态失衡、炎症与免疫障碍、凋亡及自噬等。控制脑卒中病死率并提高生存质量是当前医学研究亟待解决的难题。目前美国FDA批准用于治疗脑卒中的仅组织型纤维蛋白原酶原激活剂(tPA)，由于其严格的治疗时间窗及易诱发脑出血等并发症极大地限制了其临床的广泛应用，脑卒中的药物研发仍任重道远。随着基因工程研究的深入，科学家对运用基因工程研制药物表现出浓厚的兴趣。但是目前对缺血性脑卒筛查的方法操作复杂，暂无可以实现缺血性脑卒筛查的试剂盒。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：目前对缺血性脑卒筛查的方法操作复杂，暂无可以实现缺血性脑卒筛查的试剂盒。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种缺血性脑卒筛查试剂盒及制备方法。

本发明是这样实现的，一种缺血性脑卒筛查试剂盒的应用方法，所述缺血性脑卒筛查试剂盒的应用方法包括以下步骤：

步骤一，通过试剂盒制备模块进行缺血性脑卒筛查试剂盒的制备；通过血液采集模块利用血液采集程序进行患者静脉血的采集；通过血清分离模块利用血清分离程序进行采集的静脉血中血清的分离；

所述通过试剂盒制备模块进行缺血性脑卒筛查试剂盒的制备包括：

(1.1)将下壳体平放在水平面上，在下壳体内部的底端使用固定胶水进行点涂，将底板的四个角粘贴在下壳体上并挤压出二者间的气泡，保持底板表面的平整；

(1.2)按照自下而上的顺序进行吸水层、PCR反应组件的连接，得到检测用复合垫片；将检测用复合垫片进行裁剪，并将裁剪后的复合垫片覆盖在底板上；

(1.3)使用热压工艺进行底板与复合垫片的热压，将复合垫片的边缘与底板进行完全融合；

(1.4)进行反应检测区与样品滴加区的划分并对划分的两个区域进行分别标记；将上壳体上的反应检测区、样品滴加区与下壳体内部划定的反应检测区、样品滴加区进行对应；

(1.5)部署完毕后，使用封闭胶水进行上壳体与下壳体连接处的涂擦，胶水凝固得到缺血性脑卒筛查试剂盒；

步骤二，通过DNA提取模块利用DNA提取程序进行分离的血清中DNA的提取；将提取的DNA滴加至试剂盒的样品滴加区；

步骤三，通过PCR扩增模块利用制备得到的试剂盒进行PCR扩增，得到反应结束后的试剂盒；

步骤四，将试剂盒转移至实验室，进行PCR纯化，并通过PCR测序模块利用PCR测序程序进行PCR测序；

步骤五，通过测序结果分析模块利用测序结果分析程序进行测序结果的分析，得到miR-98的表达水平；