[发明专利]一种基于PDA@Fe3O4-MWCNTs检测食用植物油中多种真菌毒素的方法

权利要求书

1.一种基于PDA@Fe₃O₄-MWCNTs检测食用植物油中多种真菌毒素的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）在油样溶液中加入提取液进行提取；之后离心、取下层提取液加水混合均匀，离心，取上清液过膜，得到预处理的油样；其中所述的提取液为乙腈、水、乙酸的混合溶液，混合溶液中乙腈、水、乙酸的体积比为84：15：1；油样和提取液的比例以g/mL计为5-5.1：10；下层提取液和水的体积比为1：1；

（2）在PDA@Fe₃O₄-MWCNTs中加入步骤（1）得到的预处理的油样，混合均匀进行吸附10min；吸附完成后分离得到沉淀；之后在沉淀中加入解析剂进行洗脱，收集洗脱液，氮气吹干，残留物供柱前衍生化用，衍生后的溶液经氮气吹干得到残留物；之后残留物复溶，得到待测油样；其中所述的解析剂为乙腈、水、乙酸的混合溶液，混合溶液中乙腈、水、乙酸的体积比为84：15：1；预处理的油样的pH为7；预处理油样和解析剂的体积比为1：2；PDA@Fe₃O₄-MWCNTs和预处理油样的比例以mg/mL计为50：1；柱前衍生化为在盛有残留物的离心管中加入衍生试剂200 µL正己烷和100 µL三氟乙酸，振荡30 s，40 ℃水浴条件下衍生15 min；

（3）采用高效液相色谱仪对待测油样进行检测，得到多种毒素的吸收峰面积；之后根据标准曲线得到油样中多种毒素的含量；其中，采用高效液相色谱仪进行待测油样分析，色谱条件为：色谱柱：Agilent XDB-C18 4.6 mm×150 mm, 3.5 µm；柱温40 ℃；流速0.6 mL/min，进样体积10 µL；荧光检测器，检测波长：AFB1、AFB2、AFG1、AFG2激发波长365 nm，发射波长460 nm；OTA和OTB激发波长327 nm，发射波长460 nm；流动相：A为甲醇，B为0.05%甲酸，梯度洗脱如下：

所述的多种真菌毒素为黄曲霉毒素B₁、黄曲霉毒素B₂、黄曲霉毒素G₁、黄曲霉毒素G₂、赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B；

所述的PDA@Fe₃O₄-MWCNTs的制备方法，包括如下步骤：

将Fe₃O₄-MWCNTs和Tris-HCl缓冲溶液混合均匀，得到混合溶液；其中Fe₃O₄-MWCNTs和Tris-HCl缓冲溶液的比例以mg/mL计为3-5：1；在混合溶液中加入盐酸多巴胺进行反应；其中Fe₃O₄-MWCNTs和多巴胺的质量比为1-3：1；反应结束后将沉淀分离出来，洗涤、干燥、得到PDA@Fe₃O₄-MWCNTs。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的油样溶液是油样和石油醚的混合溶液；其中油样和石油醚的比例以g/mL计为1：2。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中提取是采用超声提取，提取时间为10-30 min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中提取之后的离心是室温下8000r/min离心10 min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中加水混合均匀之后的离心为4℃，12000 r/min离心10 min。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的上清液过膜采用的滤膜的规格为0.22 µm。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的吸附是于振荡器中以1500 r/min振摇10 min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的分离是用外加磁铁分离固液两相。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中氮气吹干的条件为40 ℃，1 mL/min。