[发明专利]一种乳双歧杆菌冻干保护剂及其使用方法

说明书

本发明公开了一种乳双歧杆菌冻干保护剂及其使用方法，属于益生菌生产领域。本发明的冻干保护剂包含如下按质量百分比计的成分：海藻糖6‑8%、麦芽糊精6‑8%，蔗糖1‑4%、维生素C 0.01‑0.05%、甘油1‑5%、L‑精氨酸0.1‑1%，余量为水；其制备方法为：维生素C溶解于适量水中，用滤膜过滤除菌；用余量的水溶解其余组分，搅拌均匀后灭菌；将两者混匀。其使用方法为：将离心收集的菌泥与冻干保护剂混匀后进行冷冻干燥。本发明的冻干保护剂可使乳双歧杆菌菌体冻干存活率稳定在80%以上，菌粉活菌数为1×10supgt;12/supgt;CFU/g，菌粉保藏1年时存活率为50%以上，大大提高了菌体冻干存活率及后期菌粉稳定性。

技术领域

本发明属于益生菌生产领域，具体涉及一种乳双歧杆菌冻干保护剂及其使用方法。

背景技术

乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)又称动物双歧杆菌，归属于双歧杆菌属。双歧杆菌为革兰氏阳性菌，无鞭毛、不运动，不形成芽孢，厌氧，其菌体形态各异，典型的有V形、 Y形和曲状等，主要存在于人类和哺乳动物肠道内，能够定植于肠道且形成优势菌群发挥益生功效，如调节肠道菌群并防治相关疾病、降低胆固醇、增强机体免疫力、延缓衰老等，是人体内的重要益生菌。因其独特的益生功效，已广泛应用于食品、医疗保健、畜禽养殖等领域。

目前，乳双歧杆菌菌粉主要通过真空冷冻干燥技术来生产，菌液直接冷冻干燥存活率极低，而合适的冷冻干燥保护剂能够大大提高菌体存活率，除此之外，菌粉的后期储藏稳定性也与冻干保护剂有着密切的关系，因此开发一种合适的乳双歧杆菌冻干保护剂尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于解决现有冷冻干燥生产乳双歧杆菌菌粉菌体存活率低、菌粉菌数含量低的问题，提供一种乳双歧杆菌冻干保护剂及其使用方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种乳双歧杆菌冻干保护剂，包含如下按质量百分比计的成分：海藻糖6-8％、麦芽糊精 6-8％，蔗糖1-4％、维生素C 0.01-0.05％、甘油1-5％、L-精氨酸0.1-1％，余量为水。所述的麦芽糊精型号为MD20，DE在18％～22％之间，有一定的吸潮性，溶解性良好，在食品中使用时不会提高黏度。所述的L-精氨酸的质量百分比优选为0.5-0.8％。

优选的，所述的乳双歧杆菌冻干保护剂包含如下按质量百分比计的成分：海藻糖6％、麦芽糊精8％，蔗糖2％、维生素C 0.02％、甘油3％、L-精氨酸0.5-0.8％，余量为水。

所述的乳双歧杆菌冻干保护剂的制备方法，包括如下步骤：维生素C溶解于适量的水中，用滤膜过滤除菌后，得到溶液A；再用余量的水溶解海藻糖、麦芽糊精、蔗糖、甘油、L-精氨酸，搅拌均匀后灭菌，得到溶液B；将溶液A和溶液B混合均匀后得到完整的保护剂，存于4℃备用。优选的，所述的滤膜为0.22μm的滤膜；所述的灭菌的条件为115℃灭菌20min。

所述的乳双歧杆菌冻干保护剂的使用方法，包括如下步骤：将离心收集的菌泥与冻干保护剂混合均匀，冷冻干燥后，得到乳双歧杆菌菌粉。

优选的，所述的乳双歧杆菌冻干保护剂的使用方法，包括如下步骤：将离心收集的菌泥与冻干保护剂按照质量比1:1～2混合均匀，置于冷冻干燥机内，-40℃～50℃预冻2-3h，再于10-20Pa条件下2-4h升温至-10℃～-15℃冷冻干燥10-15h，后于10-20Pa条件下2-4h升温至20℃～25℃冷冻干燥10-15h，即可得到乳双歧杆菌菌粉。