[发明专利]一种检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法在审
| 申请号： | 202110086245.0 | 申请日： | 2021-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN112725402A | 公开（公告）日： | 2021-04-30 |
| 发明（设计）人： | 朱灏 | 申请（专利权）人： | 华夏源细胞工程集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;C12N5/078;C12N5/073 |
| 代理公司： | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人： | 张静 |
| 地址： | 201100 上海市闵行*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 羊膜 上皮细胞 体外 抑制 淋巴细胞 增殖 方法 | ||
1.一种检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，其包括：人羊膜上皮细胞与染色后的PBMC细胞在含有游离氨基刺激剂存在的条件下在第一完全培养基中进行共培养后，记录淋巴细胞增殖能力。
2.根据权利要求1所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法还包括：人羊膜上皮细胞接种：取人羊膜上皮细胞悬液，进行n次离心去上清后，使用完全培养基进行重悬，之后接种培养，n≥1。
3.根据权利要求2所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法还包括：将接种培养的人羊膜上皮细胞去增殖后继续培养。
4.根据权利要求1-3任一项所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，所述刺激剂在第一完全培养基中的终浓度为2.2-2.6μg/mL。
5.根据权利要求4所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，所述游离氨基刺激剂为anti-CD3和/或anti-CD28。
6.根据权利要求5所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，所述游离氨基刺激剂为anti-CD3和anti-CD28，其浓度比为1：(0.8-1.2)。
7.根据权利要求6所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，当n＝1时，所述完全培养基含有8-12wt％胎牛血清。
8.根据权利要求7所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，所述完全培养基为Gibco 1640培养基。
9.根据权利要求8所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法，其特征在于，所述人羊膜上皮细胞接种过程中，接种培养的条件为：4.8-5.2vol％CO2，温度为30-40℃，培养20-24h。
10.一种根据权利要求1-9任一项所述检测人羊膜上皮细胞体外抑制淋巴细胞增殖抑制方法在免疫调节中的应用。
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