[发明专利]一种藜麦小分子杂多糖的制备方法

权利要求书

1.一种藜麦小分子杂多糖的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1选取并粉碎藜麦原料，筛分，筛分后原料用乙醇回流提取，提取后过滤并收集滤渣，蒸出乙醇后，收集蒸出料；

S2针对得到的蒸出料，先采用PBS缓冲溶液浸润后，其中PBS缓冲液的体积与藜麦原料粉的质量之比为5～10ml：1g，升温到50~60℃并加入α-淀粉酶保温1~3 h，随后煮沸提取1~3h，过滤提取液，过滤后的液体降温至保温的温度50~60℃后，再次加入α-淀粉酶50~60℃保温1~3h，得到保温液；其中，所述的α-淀粉酶的加入量为每100g藜麦原料粉加入活性单位为2500～15000 U的酶制剂；

S3将得到的保温液经过8000×g高速离心10min，得到的保温上清液经过前序处理后，得到处理液，随后将处理液再次经过8000×g高速离心10min，得到上清处理液；所述的前序处理为，先将得到的保温上清液中加入氯化钙固体粉末后煮沸30 min，冷却至保温温度后，高速离心后得到混合上清液，将混合上清液中加入乙二胺四乙酸二钠粉末，得到处理液；

S4将得到的上清处理液中加入其两倍体积的无水乙醇，过夜沉淀，随后8000×g高速离心10min，得到沉淀物，用无水乙醇反复洗涤沉淀物后，挥发沉淀物中的残余乙醇，得到精制藜麦非淀粉多糖；

S5将得到精制藜麦非淀粉多糖采用“超声波-双氧水-Vc-超滤”的在线循环降解的方法，得到多糖降解液；

S6将得到的多糖降解液采用阴离子交换树脂吸附，离子交换树脂与多糖降解液的固液比为1g：5～10ml，以浓度为0.1～0.5mol/L的氯化钠溶液解吸后得到解吸液，氯化钠溶液的体积与阴离子交换树脂的质量之比为3～5ml：1g，将得到的解吸液用截留分子量为10000Da的超滤膜管超滤，得到的超滤液经过真空冷冻干燥，即得到藜麦小分子杂多糖，其中，所述的超滤膜，实际为管状的，外面有个夹套管，样品溶液在膜管内逆向流动才能够充满，从而使整个超滤膜管内没有气泡，在一定压力条件下，小分子能够穿透过膜，并从流出口流出，从而被收集，因此其中的超滤膜采用超滤系统的超滤膜管；

所述的在线循环降解的具体步骤为：

a.将S4中的精制藜麦非淀粉多糖加蒸馏水复溶，溶解物高速离心去除沉淀，得到上清液；

b.将得到的上清液加蒸馏水稀释至浓度为50~200 mg/ml，得到稀释液；

c.将稀释液中分别加入双氧水和维生素C试剂，搅拌均匀后，在超滤系统中，辅助超声波，循环降解20~50 min；

所述的超滤系统包括泵循环管以及玻璃导管，所述的玻璃导管固定在泵循环管的外侧面；所述的玻璃导管远离所述的泵循环管的一端抵接有超声波发生器的顶端，并与所述的超声波发生器的顶端形成超声波降解池；所述的泵循环管固定在超滤泵的侧面，所述的超滤泵顶面分别固定有超滤膜管以及超滤储液杯；所述超滤泵固定在所述的超声波讲解池所述的超滤储液杯的顶面通过连接管连接有所述的超滤膜管的侧面，所述的超滤膜管远离所述的连接管的一端设有出液口；所述的超滤膜管顶端设有压力表；

所述的超滤系统采用串联-循环的方式，串联-循环降解时间为20~50 min；

所述的阴离子交换树脂为DEAE-Sepharose Fast Flow、DEAE-650M、Toyopearl HW-55F、Toyopearl HW-65F、D201或D301型离子交换树脂中的一种。

2.根据权利要求1所述的一种藜麦小分子杂多糖的制备方法，其特征在于：所述的保温温度为50～60℃。