[发明专利]酿酒酵母菌与嗜酸乳杆菌共培养物、其制备方法、应用和发酵豆粕

说明书

本说明书一个或多个实施例提供一种酿酒酵母菌与嗜酸乳杆菌共培养物、其制备方法、应用和发酵豆粕。所述方法包括：提供酿酒酵母菌种子培养液；接种至基础底糖液体培养基中培养，持续添加第一补料培养基；接种至发酵底糖液体培养基中发酵至pH和残糖量符合预设条件，持续以动态速率添加第二补料培养基，控制溶氧量和pH补料发酵；加入体积分数1～3％的发酵底糖液体培养基，并持续添加乳清粉培养基至体积分数8％～15％；接种体积分数1～5％的嗜酸乳杆菌培养液，第二pH下无氧发酵；添加体积分数5％～8％的糖蜜乳清粉培养基，并与固体培养基以重量份数比1:0.4～1:1混合，制粒后固态无氧发酵；50～60℃处理1～2h即得。

技术领域

本说明书一个或多个实施例涉及微生物培养技术领域，尤其涉及一种酿酒酵母菌与嗜酸乳杆菌共培养物、其制备方法、应用和发酵豆粕。

背景技术

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)也叫面包酵母或叫出芽酵母，是与人类关系最广泛的一种酵母。酿酒酵母培养物是一种微生态制剂，由特定的酿酒酵母菌种按特定的工艺和特定培养基进行充分发酵和后续处理而形成。嗜酸乳杆菌是一类能利用碳水化合物产生乳酸的革兰氏阳性细菌，安全非致病性，作为微生态制剂的重要菌种，嗜酸乳杆菌在代谢过程会产生乳酸类酸性物质。

现有的方法中，将酿酒酵母和嗜酸乳杆菌共同发酵培养后，所得共培养物中代谢产物的量不够多，难以满足在饲料生产上的需求。

发明内容

有鉴于此，本说明书一个或多个实施例的目的在于提出一种酿酒酵母菌与嗜酸乳杆菌共培养物、其制备方法、应用和发酵豆粕，以解决现有技术中的问题。

基于上述目的，本说明书一个或多个实施例提供了一种酿酒酵母菌与嗜酸乳杆菌共培养物的制备方法，包括：

提供酿酒酵母菌种子培养液和嗜酸乳杆菌种子培养液，分别经过菌种活化和两级扩大培养得到；

将酿酒酵母菌种子培养液接种至基础底糖液体培养基中培养至生物量为120～140g/L，持续添加第一补料培养基进行补料培养，得到生物量为240g/L以上，活菌数为10～15亿CFU/ml的酿酒酵母菌高密度种子培养液；

将酿酒酵母菌高密度种子培养液接种至发酵底糖液体培养基中发酵至pH和残糖量符合预设条件时，持续以动态速率添加第二补料培养基，控制溶氧量稳定在第一预设范围，pH稳定在第二预设范围内，进行补料发酵，得到生物量为300g/L以上，活菌数为15～20亿CFU/ml的酿酒酵母菌高密度发酵菌液；

在酿酒酵母菌高密度发酵菌液中加入体积分数为1～3％的发酵底糖液体培养基，并持续添加乳清粉培养基至体积分数为8％～15％；接种体积分数为1～5％的嗜酸乳杆菌培养液，在第二pH下无氧发酵，得到高密度无氧发酵菌液；

在高密度无氧发酵菌液中添加体积分数为5％～8％的糖蜜乳清粉培养基，并与固体培养基以重量份数比为1:0.4～1:1混合，制粒后固态无氧发酵，得到固态无氧发酵产物；

将所述固态无氧发酵产物在50～60℃下，处理1～2h，使酿酒酵母菌和嗜酸乳杆菌自溶，得到酿酒酵母菌与嗜酸乳杆菌共培养物。

在其中一个实施例中，所述第一预设范围为10～30％，所述第二预设范围为5.1～5.5；所述第二补料培养基包括以下质量百分比组成的物质：葡萄糖20～30％，糖蜜30～60％，尿素1～2.5％，生物营养素0.1～0.3％，七水硫酸镁0.05～0.20％，无水氯化钙0.008～0.015％，磷酸二氢钾0.05～0.15％，硫酸锌0.01～0.05％，消泡剂0.02～0.04％，余量为水。

在其中一个实施例中，所述持续以动态速率添加第二补料培养基，控制溶氧量稳定在第一预设范围，pH稳定在第二预设范围内的步骤具体包括：

当pH低于5.1时，补加氨水；