[发明专利]一种芽孢杆菌的PCR模板及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 202110074773.4 | 申请日: | 2021-01-20 |
| 公开(公告)号: | CN112646861B | 公开(公告)日: | 2023-09-22 |
| 发明(设计)人: | 曹树威;廖玉英;邱磊;王自豪;卢慧林;甘露;陈政瑜;刘克俊;黄焕昌;卢文宜;向雷 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区畜牧研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/689;C12Q1/04;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/07;C12R1/11;C12R1/085 |
| 代理公司: | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人: | 邢文月 |
| 地址: | 530001 广西壮族自*** | 国省代码: | 广西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 芽孢 杆菌 pcr 模板 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种芽孢杆菌的PCR模板的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将芽孢杆菌菌体与DNA提取液进行混合后,再加入石英砂进行混合,同时进行沸水浴处理,得到混合液;所述DNA提取液由三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、乙二胺四乙酸、聚乙烯吡咯烷酮、蛋白酶K和溶菌酶组成;
将混合液进行离心处理,取上清液,得到所述PCR模板;
所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌,地衣芽孢杆菌,解淀粉芽孢杆菌,巨大芽孢杆菌,蜡状芽孢杆菌中的任一种;
所述石英砂与DNA提取液的质量体积比以mg/μL计为(0.3~0.7):1;
所述DNA提取液的pH值为7.5~8.5,其中,三羟甲基氨基甲烷盐酸盐的浓度为15~25mmol/L,乙二胺四乙酸的浓度为1.5~2.5mmol/L,聚乙烯吡咯烷酮的浓度为8~12g/L,蛋白酶K的浓度为80~120μg/L,溶菌酶的浓度为0.8~1.2mg/mL。
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