[发明专利]一种用于粪菌移植治疗的粪菌冻干及胶囊制备工艺

说明书

本发明涉及粪菌移植治疗产品技术领域，提供一种用于粪菌移植治疗的粪菌冻干及胶囊制备工艺。粪菌胶囊的制备包括以下几个过程：(1)粪菌液的制备、留样；(2)冻干保护剂的配制；(3)培养基的配制；(4)梯度降温法冻干；(5)灌装胶囊。冻干保护剂各组分含量组成为10％～20％脱脂奶粉，1％～5％蔗糖，1％～3％明胶，其余为无菌蒸馏水。培养基的含量组成为6.43％MRS粉末，其余为无菌蒸馏水。本发明的冻干保护液的加入可以避免在冻干过程中水产生冰晶损伤细菌，配合梯度降温，有效降低在冻干过程中细菌总量的损失；粪菌胶囊肠溶胶囊壳可以保证粪菌到达肠道内发挥作用，避免胃酸将粪菌杀死。

技术领域

本发明涉及粪菌移植治疗产品技术领域，特别涉及一种用于粪菌移植治疗的粪菌冻干及胶囊制备工艺。

背景技术

“粪菌移植”(Fecal microbiota transplantation，FMT)，其定义是，将健康人粪便中的功能菌群，移植到患者肠道内，重建新的肠道菌群，实现肠道及肠道外疾病的治疗。

粪菌移植技术就是利用现代医学技术，将健康人群粪便微生物及维持微生物生存的物质分离出来，移植到患者肠道内，重建患者肠道菌群，以治疗艰难梭菌感染、难治性腹泻、便秘、胃肠炎、以及克罗恩病、溃疡性胃肠炎等肠道疾病，及肠道外疾病如肥胖、哮喘、肥胖、自闭症、抑郁症、糖尿病、癌症等疑难杂症。

粪菌移植(FMT)因超强疗效被关注，但粪菌制备、储存和物流等限制了它被普遍应用。同时，粪菌移植过程中，医生需要通过鼻饲管、胃镜或者肠镜将粪菌移植到患者体内，易造成患者的不适。

粪菌移植的治疗效果是肯定的，但是要推广应用，既要消减患者接受粪菌移植的心理障碍，又要消除操作过程中带来的不适，又要消减操作者实施粪菌移植的心理障碍，只有医患双方都接受一方法时双方才能将这一行之有效的技术手段进行下去。粪菌胶囊可以使得患者和操作者同时大幅度的减轻这一心理障碍。一方面，粪菌胶囊避免了患者需要进行鼻饲管、胃镜、肠镜等令人不适的移植方式，另一方面，粪菌胶囊避免了在实施粪菌移植过程中患者出现食物反流呛咳而引起的疾病的传播，导致的实施者不适以及医生的暴露风险。

一种用于粪菌移植治疗中的粪菌胶囊采用肠溶明胶空心胶囊，这种胶囊体外崩解实验结果，在酸性环境中2小时完好，PH6.8三十分钟崩解，贮存条件简单，-20℃保存可达一年。

目前市面上有很多粪菌胶囊冻干保护剂的制备方法，如麦芽糊精、海藻糖和甘油等制作保护剂，但这些方法总的来说有以下两点缺陷：1.保存时间短，冻干菌粉保存时间一般在一个月至半年左右。2.普通粪菌冻干技术冻干后粪菌的总菌数损失过大，本发明采用独有的冻干保护剂配方，这种冻干保护剂能有效防止在冻干过程中低温条件下水产生冰晶损伤肠道细菌，使冻干后菌的损失降低到10％左右，解决了目前世界范围内冻干前后细菌损失量过大的问题，同时，使菌粉的保存时间提升到1年左右。

发明内容

本发明提供一种用于粪菌移植治疗的粪菌冻干及胶囊制备工艺，用于解决针对上述冻干后保存时间短和冻干后粪菌的总菌数损失过大的问题，防止在冻干过程中低温条件下水产生冰晶损伤肠道细菌，有效地保证肠菌的活性。

本发明的一种粪菌移植治疗中粪菌胶囊的制备工艺，其制备和保存方法包括以下步骤：

步骤一：将粪菌液从-80℃冰箱中取出，置于37℃水浴锅中解冻20～30min，取出，放入离心机，5000r，4℃离心5分钟。

步骤二：冻干保护剂配制。

步骤三：培养基配制：取12.9gMRS培养基溶于200ml装有蒸馏水的锥形瓶，边搅拌边混匀，调节PH为7.3±0.2，高压灭菌锅121℃灭菌20min。

步骤四：取出离心后的菌液，每管加入10ml冻干保护剂，混匀仪混匀。