[发明专利]联合检测发热伴血小板减少综合征病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.联合检测发热伴血小板减少综合征病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒，包括盒体、位于所述盒体内的粘贴底板（1），所述粘贴底板（1）上延长度方向依次粘贴有样本垫（2）、胶体金结合垫（3）、NC膜（4）、吸样垫（5），所述NC膜（4）上靠近所述胶体金结合垫（3）侧设有IgM检测线（41）和IgG检测线（42），所述NC膜（4）上靠近所述吸样垫（5）侧设有质控线（43），其特征在于：所述胶体金结合垫（3）上喷涂有胶体金结合物，所述胶体金结合物包含胶体金标记的发热伴血小板减少综合征病毒重组抗原以及胶体金标记的链霉亲和素；

所述IgM检测线（41）上包被有抗人IgM单克隆抗体；

所述IgG检测线（42）上包被有抗人IgG单克隆抗体；

所述质控线（43）上包被有生物素-BSA偶联物；

所述胶体金标记的发热伴血小板减少综合征病毒重组抗原的制备方法包括以下步骤：

S101、胶体金溶液制备：取1mL1wt%氯金酸加入100mL水溶液中，加热至沸腾，再加入1-2mL1.0-1.3wt%柠檬酸三钠混匀，煮沸待胶体金溶液颜色由蓝经紫变紫红后，冷却；

S102、金标液制备：取1mL胶体金溶液加入20μL 0.1M K₂CO₃溶液，然后加入20-25μg发热伴血小板减少综合征病毒重组抗原混匀后，再加入100μL 10％BSA溶液混匀；

S103、金标液纯化：将金标液离心后弃去上清，加入PB清洗液混匀沉淀，离心后弃去上清，再加入金标复溶液溶解，即得。

2.根据权利要求1所述的联合检测发热伴血小板减少综合征病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒，其特征在于，所述胶体金标记的链霉亲和素的制备方法包括以下步骤：

S201、胶体金溶液制备：取1mL1wt%氯金酸加入100mL水溶液中，加热至沸腾，再加入1-2mL1.0-1.3wt%柠檬酸三钠混匀，煮沸待胶体金溶液颜色由蓝经紫变紫红后，冷却；

S202、金标液制备：取1mL胶体金溶液加入5μL 0.1M K₂CO₃溶液，然后加入20-25μg链霉亲和素混匀后，再加入20μL 10％BSA溶液混匀；

S203、金标液纯化：将金标液离心后弃去上清，加入PB清洗液混匀沉淀，离心后弃去上清，再加入金标复溶液溶解，即得。

3.根据权利要求1所述的联合检测发热伴血小板减少综合征病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒，其特征在于：所述胶体金结合物中，胶体金标记的发热伴血小板减少综合征病毒重组抗原和胶体金标记的链霉亲和素以1:1的体积比混匀。

4.根据权利要求1所述的联合检测发热伴血小板减少综合征病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒，其特征在于：所述胶体金结合物中胶体金的粒径为25-35nm。

5.根据权利要求1所述的联合检测发热伴血小板减少综合征病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒，其特征在于：所述质控线（43）上生物素-BSA偶联物的包被浓度为0.04-0.07mg/mL，所述IgM检测线（41）上抗人IgM单克隆抗体包被浓度为1.8－2.3mg/mL，所述IgG检测线（42）上抗人IgG单克隆抗体包被浓度为1.8－2.3mg/mL。