[发明专利]载PLK1抑制剂的聚合物囊泡药物及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了载PLK1抑制剂的聚合物囊泡药物及其制备方法与应用；基于PEG‑P(TMC‑DTC)的聚合物囊泡A3‑Ps有着致密的双硫键交联的膜，带来了卓越的稳定性和快速的细胞内药物释放，且囊泡膜的内壳的短链聚天冬氨酸能增强该囊泡装载分子靶向药volasertib(Vol)的能力，A3‑Ps的载药量、载药率高，粒径小。载Vol囊泡A3‑Ps‑Vol在提升Vol抗肿瘤活性的同时减少了其系统毒性，A3‑Ps‑Vol和非靶向Ps‑Vol及自由药Vol相比有最好的抑制SKOV‑3细胞的活性，IC₅₀为49 nM，比自由药Vol低3.5倍，这种双靶向的纳米制剂是一种高效低毒的治疗卵巢癌的疗法。

技术领域

本发明属于医药技术，具体涉及载PLK1抑制剂的聚合物囊泡药物及其制备方法与应用。

背景技术

作为女性疾病中致命的恶性肿瘤，卵巢癌的五年生存率仅为30%-40%。高致死率的原因是晚期卵巢癌病人的复发和频繁化疗（如铂药和taxane）后的耐药性。因而临床上对治疗卵巢癌的药物开发有着迫切的需求。在多种恶性肿瘤治疗方面，有着明确特异性和低毒性的靶向分子药物逐渐成为传统化疗药物的更好的替代品。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）抑制剂-olaparib在BRCA突变的卵巢癌病例中显示了良好的治疗效果，BRCA突变大约占所有卵巢癌病人的10%-15%。研究发现，有26%的卵巢癌病人的Polo样激酶1（PLK1）表达呈阳性，并且PLK1的表达和卵巢癌肿瘤的恶性程度呈正相关性，因此PLK1抑制剂volasertib（Vol）是另一个有望用于治疗卵巢癌的分子靶向药。但是，和其他小分子药类似，Vol通常会被人体快速清除，并且肿瘤的富集有限。此外，耐药性是小分子药物的另一个潜在挑战。

发明内容

目前关于Vol的靶向递送的研究很少，本发明报道了一种新型的策略，将多肽靶向的聚合物囊泡和PLK1抑制剂Vol结合，作为治疗卵巢癌的双重靶向药物。多肽靶向的囊泡A3-Ps通过聚合物PEG-P(TMC-DTC)-PAsp和A3-PEG-P(TMC-DTC)自组装得到，基于PEG-P(TMC-DTC)的聚合物囊泡有着致密的双硫键交联膜层，带来了卓越的稳定性和快速的细胞内药物释放，且囊泡的内壳的短链聚天冬氨酸能增强该囊泡装载Vol的能力，对人卵巢癌细胞，如ES-2, SKOV3和OVCAR3有高亲和力。本发明是第一篇关于Vol的靶向递送用于卵巢癌治疗的报道，结果表明，该双重靶向药物显著改善了小鼠SKOV-3 皮下肿瘤的治疗效果。

本发明采用如下技术方案：

载PLK1抑制剂的聚合物囊泡，包括聚合物囊泡与PLK1抑制剂；所述聚合物囊泡由PEG-P(T-DTC)-PAsp制备，或者所述聚合物囊泡由PEG-P(T-DTC)-PAsp与A-PEG-P(T-DTC)制备。

本发明还公开了聚合物在制备载PLK1抑制剂的聚合物囊泡中的应用，或者在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其在制备治疗卵巢癌药物中的应用；所述聚合物为PEG-P(T-DTC)-PAsp，或者所述聚合物为PEG-P(T-DTC)-PAsp与A-PEG-P(T-DTC)。

本发明进一步公开了上述载PLK1抑制剂的聚合物囊泡在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其在制备治疗卵巢癌药物中的应用。

本发明公开了上述载PLK1抑制剂的聚合物囊泡的制备方法，将聚合物溶液与PLK1抑制剂溶液混合，然后孵育，再透析，得到载PLK1抑制剂囊泡。简要地，将100 mL聚合物DMSO溶液（10 mg/mL）与溶解在DMSO中的Vol（20 mg/mL, 5 mL）混合；混合溶液加入0.9 mL的HEPES缓冲溶液（5 mM, pH 6.8），200 rpm搅拌5分钟后，分散相被转入摇床（100 rpm，35℃）孵育6 h，再在HEPES (5 mM, pH 7.4)中透析（截留分子量为7000 Da），得到载PLK1抑制剂囊泡。本发明载PLK1抑制剂的聚合物囊泡由聚合物囊泡与PLK1抑制剂组成，为一种纳米药物，经过粒径和Zeta电位的测量，通过紫外分光光度计定量Vol的含量来计算出载药量（DLC）和包封率 (DLE)。