[发明专利]一种用于鉴定甘蓝叶片蜡粉性状的分子标记、引物对及其应用在审
| 申请号： | 202110060928.9 | 申请日： | 2021-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN112813180A | 公开（公告）日： | 2021-05-18 |
| 发明（设计）人： | 许园园;曾爱松;宋立晓;邢苗苗;严继勇 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 丁静静 |
| 地址： | 210014 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 鉴定 甘蓝 叶片 性状 分子 标记 引物 及其 应用 | ||
1.一种用于鉴定甘蓝叶片蜡粉性状的分子标记，其特征在于，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.：1所示。
2.用于鉴定甘蓝叶片蜡粉性状的引物对，其特征在于，包括如下引物对：
上游引物Bol-Del2-F1：5’-CCTCGAAACAAACAGCCACG-3’；
下游引物Bol-Del2-R1：5’-CTCTTCGGGTTGGCATTCCT-3’。
3.权利要求2所述引物对在制备甘蓝叶片蜡粉性状检测试剂中的应用。
4.权利要求2所述引物对在鉴定甘蓝叶片蜡粉性状中的应用。
5.一种鉴定甘蓝叶片蜡粉性状的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)提取待检测甘蓝植株的基因组DNA；
(2)以步骤(1)得到的基因组DNA为模板，利用SEQ ID NO.：2～3所示的引物对进行PCR扩增；
(3)对PCR扩增产物进行电泳检测；
若电泳检测结果在84bp处有特异性条带，则待检测甘蓝植株为有蜡粉单株；
若电泳检测结果在84bp处无特异性条带，则待检测甘蓝植株为亮叶单株。
6.根据权利要求5所述的鉴定甘蓝叶片蜡粉性状的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述PCR扩增，其PCR扩增体系为20μl体系，包括：基因组DNA 1μl、上下游引物各1μl、2xEasyTaqPCR SuperMix 10μl、余量用水补齐。
7.根据权利要求5所述的鉴定甘蓝叶片蜡粉性状的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述PCR扩增，其PCR扩增的条件如下：
94℃预变性3min；94℃变性50S，60℃50S，72℃延伸100S，35个循环；72℃延伸10min。
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