[发明专利]一种靶向草地贪夜蛾Doublesex基因雌性特异E3外显子的sgRNA及其应用有效
申请号: | 202110055205.X | 申请日: | 2021-01-15 |
公开(公告)号: | CN112852806B | 公开(公告)日: | 2022-10-14 |
发明(设计)人: | 萧玉涛;程英;曾宇笑;靳明辉;廖重宇 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院深圳农业基因组研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/89;A01K67/033 |
代理公司: | 北京方安思达知识产权代理有限公司 11472 | 代理人: | 陈琳琳;武玥 |
地址: | 518120 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 靶向 草地 夜蛾 doublesex 基因 雌性 特异 e3 外显子 sgrna 及其 应用 | ||
1.一种靶向草地贪夜蛾Doublesex基因雌性特异E3外显子的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA在草地贪夜蛾Doublesex基因雌性特异E3外显子上的两个靶点的核苷酸序列,如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
2.权利要求1所述的sgRNA在遗传防控草地贪夜蛾中的应用。
3.一种利用CRISPR/Cas9系统遗传防控草地贪夜蛾的方法,包括以下步骤:
1)获得草地贪夜蛾雌性特异E3外显子序列;
2)设计靶向草地贪夜蛾Doublesex基因雌性特异E3外显子的sgRNA,所述sgRNA在草地贪夜蛾Doublesex基因雌性特异E3外显子上的两个靶点的核苷酸序列,如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;
3)将Cas9的mRNA或蛋白和步骤2)设计的sgRNA混合,将混合物导入草地贪夜蛾的受精卵,实现Doublesex基因的E3外显子敲除,获得雌性特异性不育的草地贪夜蛾。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤3)将混合物通过显微注射方式导入草地贪夜蛾的受精卵。
5.一种用于遗传防控草地贪夜蛾的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括草地贪夜蛾Doublesex基因雌性特异E3外显子的sgRNA和Cas9的mRNA或蛋白,所述sgRNA在草地贪夜蛾Doublesex基因雌性特异E3外显子上的两个靶点的核苷酸序列,如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示。
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