[发明专利]6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器及其在菌株筛选中的应用有效
| 申请号： | 202110050546.8 | 申请日： | 2021-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN112779278B | 公开（公告）日： | 2022-04-19 |
| 发明（设计）人： | 刘龙;陈坚;吕雪芹;武耀康;卢健行;堵国成;李江华;刘长峰 | 申请（专利权）人： | 江南大学;山东润德生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12N15/65;C12N15/64;C12N15/90;C12N1/21;C12P19/26;C12R1/125 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 磷酸 氨基 葡萄糖 生物 传感器 及其 菌株 筛选 中的 应用 | ||
1.一种6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器，其特征在于，所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器整合表达在枯草芽孢杆菌的基因组上，包括转录因子GamR、包括GamR结合位点的启动子、采用包括GamR结合位点的启动子来表达的T7 RNA聚合酶，以及采用T7启动子来表达的荧光蛋白；
所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器还包括采用核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的RBS调控T7 RNA聚合酶的表达强度；
所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器还包括在包括GamR结合位点的启动子上添加阻遏蛋白LacI的结合位点lacO；
所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器还包括在T7启动子的下游添加转录因子GamR的结合位点gamO。
2.根据权利要求1所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器，其特征在于，所述的包括GamR结合位点的启动子为P
3.根据权利要求1所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器，其特征在于，整合表达的位点为枯草芽孢杆菌基因组的
4.权利要求1~3任一项所述的6-磷酸氨基葡萄糖生物传感器在高通量筛选微生物菌株中的应用，其特征在于，所述的应用是筛选高产6-磷酸氨基葡萄糖、N-乙酰氨基葡萄糖、神经氨酸或透明质酸的枯草芽孢杆菌。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在应用过程中，先将枯草芽孢杆菌中将6-磷酸氨基葡萄糖转化为N-乙酰氨基葡萄糖、神经氨酸或透明质酸的酶的基因消除，筛选得到6-磷酸氨基葡萄糖产量高的菌株后，再转入相关的基因。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在筛选高产N-乙酰氨基葡萄糖的枯草芽孢杆菌过程中，先消除磷酸氨基葡萄糖乙酰化酶基因。
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