[发明专利]维生素冻干粉针剂中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的检测方法

权利要求书

1.一种维生素冻干粉针剂中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品溶于溶剂中，得到N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品工作溶液，取两份N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品工作溶液注入液相色谱仪进行检测，第一份进三针，第二份进两针，五针对照品工作溶液中主峰面积/相应对照品称重比值的RSD应不得过2%；

（2）将样品溶于水中，得到供试品溶液，将供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，计算供试品溶液中的N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸含量；水

流动相流速为0.7～0.9ml/min，进样量：2～5μl，柱温：38℃～42℃，采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，采用紫外检测器进行检测，检测波长为273nm；

所述流动相A为0.1%甲酸水溶液，所述流动相A的pH 3.8～4.2，流动相B为乙腈；

所述梯度洗脱过程如下：

时间/min     流动相A/%     流动相B/%

0 -10          100          0

10.5-13        40           60

13.5-20        100          0。

2.如权利要求1的维生素冻干粉针剂中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的检测方法，其特征在于，所述乙腈为色谱纯，水为电阻率18.6Ω的超纯水，甲酸为分析纯。

3.如权利要求1的维生素冻干粉针剂中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的检测方法，其特征在于，所述N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品工作溶液的配制过程如下：

称取N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品约20mg置200mL量瓶中，精密称定，加水溶解稀释至刻度，摇匀，得N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品贮备液；精密移取N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品贮备液2-3ml于100ml～250ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品工作溶液。

4.如权利要求1的维生素冻干粉针剂中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制过程如下：

当维生素冻干粉针剂中含有9种维生素时，取一瓶含9种维生素的冻干粉针剂，加2ml水溶解后，用水多次冲洗并全部转移至10ml容量瓶中，定容，即得供试品溶液。

5.如权利要求1的维生素冻干粉针剂中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制过程如下：

当维生素冻干粉针剂中含有13种维生素时，取一瓶含13种维生素的冻干粉针剂，加2ml水溶解后，用水多次冲洗并全部转移至10ml容量瓶中，在定容前加入200μL无水乙醇除去泡沫，定容，即得供试品溶液。

6.如权利要求1的维生素冻干粉针剂中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液中的N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸含量相当于主成分VB9的百分比按以下公式计算：

  Cst：第二份N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品工作溶液的浓度；

As：供试品溶液中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的峰面积；

Ast：测得第二份N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸对照品工作溶液的两针峰面积均值；

S：供试品溶液中VB9的浓度；

D%：N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的含量相当于主成分VB9的百分比。