[发明专利]一种用于评估131

说明书

本发明公开了一种用于评估¹³¹I治疗分化型甲状腺癌效果的引物及试剂盒。通过本发明可以同时检测BRAF基因、TERT基因、HRAS基因和NRAS基因的9个基因位点变异，这些基因位点的变异都与¹³¹I治疗分化型甲状腺癌效果密切相关。因此使用本发明对患者的样本进行检测，可以协助医生对分化型甲状腺癌患者使用¹³¹I进行治疗的临床效果进行科学评估，为患者精准治疗方案的制定提供依据，无疑具有非常重要的临床使用价值。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域，具体地涉及一种用于评估¹³¹I治疗分化型甲状腺癌效果的试剂盒。

背景技术

甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma，PTC)和甲状腺滤泡状癌(follicular thyroid carcinoma，FTC)占甲状腺癌的90%以上，由于他们在一定程度上保留了甲状腺滤泡上皮细胞的功能，如钠碘转运体（sodium iodide symporter，NIS）的表达及摄碘的能力、分泌甲状腺球蛋白（thyroglobulin，Tg）的能力、依赖于促甲状腺激素（thyroid-stimulating hormone，TSH）生长方式等，因此，被称为分化型甲状腺癌（differentiated thyroid cancer，DTC），DTC尤其是PTC的发病率升高是致使近年来甲状腺癌发病率升高的主要因素。¹³¹I治疗分化型甲状腺癌（DTC）在国际上已有60年的历史，我国开展此项工作亦近50年。目前，国内各省、直辖市、自治区均已开展此项治疗工作，成为DTC最主要的治疗方法之一。

¹³¹I治疗分化型甲状腺癌的原理在于甲状腺细胞对碘化物具有特殊的亲和力，口服一定量的¹³¹I后，能被甲状腺大量吸收，具有细胞杀伤作用的¹³¹I进入甲状腺组织中，¹³¹I在衰变时，能放射出β射线（占99%）和γ射线（占1%）。前者的有效射程仅有0.5～2毫米，能选择性地破坏甲状腺滤泡上皮而不影响临近组织，甲状腺组织能受到长时间的集中照射，其腺体被破坏后逐渐坏死，代之以无功能的结缔组织，从而降低甲状腺的分泌功能，达到类似甲状腺次全切除手术的目的。

临床数据表明，不同患者对¹³¹I治疗的敏感性存在一定差异，具体表现在有些患者对¹³¹I治疗敏感，但有一部分患者则表现出对¹³¹I治疗的抵抗，因此为了很好地区分这些患者，临床上亟需一种准确率高的方法用于评估¹³¹I治疗分化型甲状腺癌的效果，从而实现对患者的精准治疗。

随着分子生物学技术的发展，发现¹³¹I治疗的敏感性差异产生的背后有不同基因发生变异的基础。例如，《持续/复发及转移性甲状腺癌诊疗指南》（中国临床肿瘤学会（CSCO），2018. V1）指出，甲状腺乳头状癌（PTC）原发灶的BRAF基因 V600E突变及TERT基因启动子突变与远处转移灶的摄碘能力下降有关，导致碘吸收能力的下降，碘治疗受益的可能性小，但到目前为止这些专家共识或诊疗指南中并没有明确TERT基因上具体有哪些启动子区域影响了摄碘能力。通过大量的临床研究，我们发现携带TERT基因启动子C228T和C250T位点突变的甲状腺乳头状癌患者，对碘的吸收能力下降，术后应用¹³¹I放射治疗欠佳。

此外，虽然也有研究发现在具有乳头状核特征的甲状腺滤泡状癌中，携带NRAS基因突变的患者，其接受¹³¹I治疗的获益可能性较大，但对于RAS基因的其他亚型是否和¹³¹I的治疗效果有关，尚未有明确定论。经研究，我们发现HRAS基因上G12/G13/Q61区域的突变和¹³¹I的治疗效果密切相关，但KRAS基因上该突变和¹³¹I的治疗效果不相关。