[发明专利]IL-18基因融合H2Kk基因在制备增强细胞免疫的细胞中的应用、细胞及制备方法

权利要求书

1.一种K562细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将跨膜表达RBD基因插入到质粒中，得到PB-S-RBD-NGFR质粒；

所述跨膜表达RBD基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

2)将IL-18基因融合H2Kk基因克隆到步骤1)得到的PB-S-RBD-NGFR质粒中，得到含融合基因质粒；

3)将所述步骤2)得到的含融合基因质粒电转化到K562细胞中，得到增强细胞免疫的

K562细胞。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)质粒包括PB-713质粒。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述跨膜表达RBD基因通过Bsu36I和BmgBI双酶切插入到质粒中。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)电转化的条件包括：电压560mV，电击时间30ms。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)含融合基因质粒的质量与K562细胞的数量比为7μg:1×10⁷个。

6.一种增强细胞免疫的K562细胞，其特征在于，采用权利要求1~5任一项所述制备方法制备得到。

7.根据权利要求6所述的增强细胞免疫的K562细胞，其特征在于，所述IL-18基因融合H2Kk基因后的核苷酸序列如SEQ ID No .1所示。

8.权利要求6或7所述的增强细胞免疫的K562细胞在制备增强细胞免疫的疫苗中的应用。