[发明专利]一种Aureobasidin A的发酵制备方法及其培养基

权利要求书

1.一种Aureobasidin A的制备方法，其包括如下步骤：

(1)将Aureobasidin A生产菌株进行菌种活化；

(2)菌悬液制备；

(3)种子扩培；

(4)发酵；

其中，所述步骤(3)包括：将步骤(2)所得菌悬液接种入一级种子培养基中，一级培养，然后取一级培养液接种入二级种子培养基中，二级培养。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述一级培养中，接种量为0.05-1％，培养时间为15-72h；

优选地，所述一级培养包括：将步骤(2)所得菌悬液接种入一级种子培养基中，摇瓶培养，接种量为0.1-1％，摇床转速为180-250rpm，种龄15-30h。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述二级培养中，接种量为0.05-1％，培养时间为8-60h；

优选地，所述二级培养包括：将一级种子培养液接种入二级种子培养基中，在种子罐进行扩培，接种量为0.05-0.5％，搅拌转速为150-300rpm，溶氧≥30％，种龄15-30h。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养中，接种量为0.5-20％，溶氧值为5-50％；

优选地，所述发酵培养包括：将经过步骤(2)扩培的种子培养液，接种入发酵培养基，发酵培养4天以上，移种量为0.5-10％，搅拌转速200-400rpm、溶氧值10-40％。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述Aureobasidin A生产菌株为菌株CGMCC NO.20887。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述Aureobasidin A生产菌株的培养温度为20-30℃，pH为1.5-8.0；

优选地，所述Aureobasidin A生产菌株的培养温度为24-26℃，pH为5.5-6.5。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(3)所用种子培养基包含：葡萄糖1-10％，酵母提取物0.1-5％；或，

所述种子培养基包含：葡萄糖1-5％，淀粉0.5-5％，酵母提取物0.1-4％，玉米浆0.1-1％，磷酸氢二钾0.05-0.5％、硫酸镁0.01-0.1％、氯化钠0.05-0.5％。

8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(4)所用发酵培养基包含：葡萄糖1-5％，糊精1-10％，淀粉1-5％，酵母提取物1-5％，黄豆饼粉1-10％，硫酸铵0.1-1％，磷酸氢二钾0.05-0.5％，硝酸钠0.05-0.5％。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基还包含碳源调节因子，所述碳源调节因子为含有异丙基基团的化合物，其在所述发酵培养基中的含量为0.01-1％；

优选地，所述碳源调节因子为异丙基氯化镁，其在所述发酵培养基中的含量为0.05-0.5％。

10.一种种子培养基，其包含：葡萄糖1-5％，淀粉0.5-5％，酵母提取物0.1-4％，玉米浆0.1-1％，磷酸氢二钾0.05-0.5％、硫酸镁0.01-0.1％、氯化钠0.05-0.5％；

优选地，所述种子培养基包含：葡萄糖2％，淀粉1％，酵母提取物0.5％，玉米浆0.2％，磷酸氢二钾0.1％、硫酸镁0.05％、氯化钠0.1％。

11.一种发酵培养基，其包含：葡萄糖1-5％，糊精1-10％，淀粉1-5％，酵母抽提粉1-5％，黄豆饼粉1-10％，硫酸铵0.1-1％，磷酸氢二钾0.05-0.5％，硝酸钠0.05-0.5％；

优选地，所述发酵培养基包含：葡萄糖3％，糊精5％，淀粉3％，酵母抽提粉3％，黄豆饼粉4％，硫酸铵0.5％，磷酸氢二钾0.1％，硝酸钠0.1％。