[发明专利]一种植物来源的苦木素及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一个植物来源的苦木素及其制备方法和应用。该苦木素的制备方法如下：将常绿苦树叶子用乙醇浸泡提取，减压浓缩得粗浸膏；该提取物用大孔树脂、硅胶、凝胶及半制备的高效液相色谱柱分离，即得该化合物。该化合物对水稻纹枯病菌、西瓜尖孢镰刀菌、禾谷镰刀菌、柑桔青霉、黄瓜疫霉菌等具有明显的抑制活性。因此，该化合物可作为一种新型的植物源抗菌候选药物。

技术领域

本发明属于生物化工技术领域,具体涉及植物来源的苦木素及其制备方法和应用。

背景技术

农药是农业生产和农业经济发展中不可或缺的生产资料，是关系到全球粮食安全、食品安全、生态安全的重大战略物质。在防治农作物病虫草害的发生、保障农产品产量和质量、保障食品安全等方面具有不可忽视的作用。据统计，农药的使用每年可挽回世界农作物总产30％-40％的损失。我国生态条件复杂，耕作制度多样，属于有害生物多发、频发、重发的国家。每年我国受到病虫草害的作物种植总面积高达12190万公顷。因此，在过去几十年中，化学农药在防治农作物病虫草害、保障和提高粮食产量和质量、保障食品安全方面发挥着重要的作用。

然而，化学农药的长期不合理使用引起了一系列严重的环境和社会问题，如土壤板结酸化严重、抗药性增强、农残严重超标，生态平衡破坏、环境污染等一系列影响人们健康的隐患。特别是农药残留所致的“绿色技术壁垒”已成为当前限制我国农产品出口贸易的突出问题。因此，开发高生物活性、高选择性、低残留、易降解、无公害的绿色农药迫在眉睫。植物源农药因其有效成分为天然物质，且易分解为无毒物质、对环境无污染、难产生抗药性对有益生物安全等优点，使其成为绿色农药的一个重要的研究方向。

植物源农药按防治对象可以分为：植物源杀虫剂、植物源杀菌剂、植物源抗病毒剂、植物源除草剂等等。目前植物源杀虫剂是研究相对较成功的一类植物源农药，而且已有一些成熟的商品上市并应用与农业生产中。比如印楝素、皂素烟碱可溶性乳剂、鱼藤酮乳油、双素碱水剂、茴蒿素水剂、油酸烟碱等。但是，统计表明约85％的植物病害是由真菌引起的，如菌核病、镰刀菌、伪孢菌、布氏杆菌、疫霉、腐霉菌等。相对于植物源杀虫剂而言，植物源杀菌剂的研究要少得多，而且多数研究仅限于植物的提取物的抗菌活性，并没有一款真正用于农业生产中的植物源抗菌剂。因此研究开发新型植物源抗菌剂迫在眉睫。

常绿苦树(Picrasmajavanica)为苦木科苦木属常绿乔木，主要分布在亚洲热带地区，如印度尼西亚、印度和缅甸。在我国西双版纳、景东等地有大量分布。在民间其树皮的煎煮液可以作为奎宁的替代品治疗疟疾。在爪哇等地人们还概数的树叶榨汁治疗伤口。文献报道该植物的次级代谢产物主要是苦木素类化合物，且有抗肿瘤、抗炎、抗病毒、神经保护等活性。但是关于苦木素类化合物抗植物病原真菌的活性未见报道。

发明内容

本发明的目的之一是提供结构新颖的植物来源苦木素化合物Pj-1其结构式如下式所示：

本发明的目的之二是提供制备新颖苦木素化合物Pj-1的方法，其特征在于，该化合物是从常绿苦树的叶子中获得的，具体在于将常绿苦树的叶子粉碎，用乙醇(95％)浸泡得到浸出液，将浸出液减压蒸馏除去溶剂获得粗浸膏，将粗浸膏溶于50℃的热水中，然后用乙酸乙酯进行萃取，得到乙酸乙酯萃取物，进而使用大孔树脂、硅胶、凝胶、及半制备的高效液相色谱柱分离，即得该化合物。包括以下步骤：

S1、将常绿苦树的叶子粉碎，用乙醇(95％)浸泡3次，每次7天，得到浸出液。

S2、将浸出液减压蒸馏除去溶剂，从而获得粗浸膏。

S3、将粗浸膏溶于50℃的热水中，然后用乙酸乙酯进行萃取，得到乙酸乙酯萃取物。

S4、使用大孔树脂对乙酸乙酯萃取物进行分离，分别用30％、50％、80％、 95％乙醇作为流动相梯度洗脱，通过TLC分析最终得到4个组分Fre-1–Fre-4。