[发明专利]基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测系统及方法

权利要求书

1.一种基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测系统，其特征在于，包括：

病毒捕获探针：用于对不同病毒进行特异性的快速捕获；

所述的病毒捕获探针为通过化学键修饰了不同病毒特异性适配体的尺寸不同的微球；

分选富集装置：用于对捕获的不同病毒进行分选和富集；

所述分选富集装置为基于声表面波的微流控芯片，所述基于声表面波的微流控芯片包括铌酸锂压电基底，铌酸锂压电基底上设置有叉指换能器，叉指换能器的一侧设置有PDMS微流道系统，所述基于声表面波的微流控芯片能够通过声表面波实现不同尺寸微球的分选；

荧光标记探针：用于对分选富集得到的不同病毒进行荧光标记；

荧光检测系统：用于对标记后的不同病毒进行检测。

2.根据权利要求1所述的一种基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测系统，其特征在于，所述微球为二氧化硅微球、聚苯乙烯类有机聚合物微球、聚丙烯酸类有机聚合物微球或生物大分子聚合物微球；

所述化学键修饰采用酰胺键、硫醇键或生物素-亲和素结合键。

3.根据权利要求1所述的一种基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测系统，其特征在于，所述的PDMS微流道系统包含依次连接的入口流道、主流道和分选出口流道，所述入口流道高度为70μm，宽度为100μm，长度为8mm，所述主流道高度为70μm，宽度为350μm，长度为15mm，所述分选出口流道高度为70μm，宽度为175μm，长度为8mm；

所述的叉指换能器包括50对叉指，叉指宽度和叉指间隙为20μm，声孔径为2mm。

4.根据权利要求1所述的一种基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测系统，其特征在于，所述的荧光标记探针为修饰了不同荧光分子或荧光基团的不同病毒的特异性适配体；所述荧光分子或荧光基团为FITC、FAM、Texas Red、Cy5或Cy7。

5.一种基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备病毒捕获探针：

所述病毒捕获探针由不同尺寸的微球和不同病毒的特异性适配体通过化学键结合组成的；

(2)病毒捕获：

所述病毒捕获具体为：将步骤(1)得到的病毒捕获探针与待检测病毒悬液充分孵育；

(3)病毒分选与富集：

所述病毒分选与富集具体在基于声表面波的微流控芯片中完成，利用声表面波对不同尺寸的微球进行分选，从而完成对病毒的富集分选；

(4)病毒荧光标记与检测：

所述病毒荧光标记与检测具体为：将收集的捕获病毒的微球与荧光标记探针充分孵育后，完成微球的荧光标记，然后通过激光诱导荧光检测得到样品富集后的荧光强度。

6.根据权利要求5所述的一种基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述微球为二氧化硅微球、聚苯乙烯类有机聚合物微球、聚丙烯酸类有机聚合物微球或生物大分子聚合物微球；

所述微球与不同病毒的特异性适配体的化学键结合为羧基与氨基形成酰胺键、羧基与巯基形成硫醇键或生物素亲和素特异性结合。

7.根据权利要求5所述的一种基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测方法，其特征在于，步骤(4)中所述的荧光标记探针为修饰了不同荧光分子或荧光基团的不同病毒的特异性适配体；所述荧光分子或荧光基团为FITC、FAM、Texas Red、Cy5或Cy7。

8.根据权利要求5所述的一种基于适配体和声表面波的病毒分选富集检测方法，其特征在于，步骤(2)中在待检测病毒悬液中加入病毒捕获探针后，室温振荡孵育2小时；

步骤(3)中将步骤(2)中充分孵育得到的待检测样品液和鞘流液通过样品入口通入微流控芯片中，所述鞘流液为质量浓度0.01g/ml的SDS溶液，施加声场后，捕获病毒的微球在声场力的作用下向特定收集出口偏转，在出口处对微球进行回收。